Információ

Nitrogén-oxid okozta hematuria

Nitrogén-oxid okozta hematuria


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Nem várható gyógyszerkölcsönhatás a megfelelően adagolt NO és más gyógyszerek között, de a mellékhatások közé tartozhat a zajos légzés, hematuria, vagy esetleg atelektázia. (pg.no:577; Goodman és Gilman Pharmacology 13e)

Mi az alapja ennek a vérömlenynek? Ez a nitrogén-monoxid vérlemezke-gátló hatása miatt van?


Nitrogén-oxid okozta hematuria - Biológia

A haematuria bizonyos glomeruláris betegségek jóindulatú előjeleként ismert, de az elmúlt évtizedben új bizonyítékok mutatták ki, hogy negatív hatással van a vesebetegség progressziójára. A vörösvértestekből felszabaduló hemoglobin, hem vagy vas által kiváltott oxidatív stressz citotoxikus hatásai felelősek lehetnek a humán biopsziás mintákon megfigyelt tubuláris sérülésért. A hematuria kialakulásáért felelős pontos mechanizmusok azonban továbbra sem tisztázottak. A szabálytalan körvonalú és alakú vörösvértestek jelenléte a vizeletben azt jelzi, hogy a vörösvértestek a glomeruláris kapillárisból a vizelettérbe távoznak. Ezért a glomeruláris haematuria a glomeruláris filtrációs gát diszfunkciójának vagy károsodásának markere lehet. Ebben az áttekintésben bemutatunk néhány kulcsfontosságú kérdést a hematurikus betegségek epidemiológiájával és patogenezisével, valamint vesemorfológiai eredményeikkel kapcsolatban.

Alapvető tipp: A legújabb eredmények arra utalnak, hogy a glomeruláris haematuria negatív prognosztikai tényező lehet a vesefunkció kimenetelében. A glomeruláris vérzésért egy törékenyebb és könnyen felszakadozó glomeruláris filtrációs gát (GFB) lehet felelős. Számos tényezőt társítottak ehhez a patogén folyamathoz, többek között: (1) a GFB komponenseinek genetikai megváltozása, ami a GFB törékenyebb és könnyebben felszakadt szerkezetéhez vezet (2) a toxikus molekulák rendellenes lerakódása a GFB-ben és (3) fokozott gyulladásos válasz, autoimmun betegségek, fertőzések vagy primer glomerulonephritis esetén. Ebben az áttekintésben részletesen ismertetjük ezeket a kóros mechanizmusokat, különös tekintettel a hematurikus betegségekre és azok vesemorfológiai leleteire.

  • Idézet: Yuste C, Gutierrez E, Sevillano AM, Rubio-Navarro A, Amaro-Villalobos JM, Ortiz A, Egido J, Praga M, Moreno JA. A glomeruláris haematuria patogenezise. World J Nephrol 2015 4(2): 185-195
  • URL:https://www.wjgnet.com/2220-6124/full/v4/i2/185.htm
  • DOI:https://dx.doi.org/10.5527/wjn.v4.i2.185

A haematuria a vese- és urológiai betegségek gyakori megnyilvánulása. Ezt úgy írják le, mint 2-nél több vörösvérsejt (RBC) jelenléte nagy teljesítményű mezőnként a vizeletüledékben. Ha a vizeletben nagy mennyiségű vörösvértest van jelen, a vizelet színe vörös, és makroszkópos haematuria-nak nevezik. A mikroszkópos haematuria (MH) mikroszkópos vizsgálattal vagy mérőpálcikával kimutatható, így valós előfordulása ismeretlen[1,2]. A haematuria eredete szerint lehet glomeruláris vagy nem glomeruláris, azonban jelen áttekintésben kizárólag a glomeruláris haematuria veseprognózisra gyakorolt ​​​​hatása miatt foglalkozunk. A glomeruláris haematuria pontos patogén mechanizmusai továbbra sem tisztázottak. A haematuriával gyakran összefüggő genetikai rendellenességekért felelős specifikus molekuláris hiba azonosítása azonban rávilágított a lehetséges mechanizmusokra. Ezek a genetikai betegségek a glomeruláris filtrációs gát (GFB) károsodását okozzák, ami törékenyebb és könnyen felszakadozó szerkezethez vezet. Néha a glomeruláris alapmembrán (GBM) közvetlen megváltoztatásával [ahogyan Alport-szindróma (AS), vékony bazális membrán nephropathia (TBMN) vagy örökletes angiopátia, nephropathia, aneurizmák és izomgörcsök (HANAC) szindróma] vagy podocita szerkezete [Miozin] nehézlánc-9 (MYH9)-asszociált vesebetegség], és mások a toxikus vegyületek rendellenes lerakódása miatt, például tárolási rendellenességek esetén (Fibronectin glomerulopathia, Immunotactoid és Fibrilláris glomerulonephritis). Az öröklött genetikai mutációk a komplement alternatív útvonalának abnormális szabályozásához is vezethetnek, és ezáltal C3 glomeruláris lerakódáshoz [C3 glomerulopathiák, mint a H komplement faktorral kapcsolatos protein 5 (CFHR5) nephropathia vagy sűrű lerakódási betegség], amely erős gyulladásos választ indukál, ami fagocitákat eredményez. kemotaxis, opszonizációval és sejtek lízisével, amely könnyen megmagyarázhatja a haematuria kialakulását. A haematuria az autoimmun betegségek [antineutrofil citoplazmatikus antitestek (ANCA), vasculitis, GBM-betegség, szisztémás lupus erithematosus vagy Cryoglobulinemia], fertőzések (endocapilláris glomerulonephritis) vagy primer glomerulonephritis [IgA Nephropathy (IgA) , Membranoproliferatív, Crescentic] (1. táblázat). Ebben az áttekintésben leírjuk a kórszövettani eredményekért felelős molekuláris mechanizmusokat ezekben a betegségekben, hogy megmagyarázzuk a haematuria patogenezisét és összefüggését a vese kimenetelével.

Glomeruláris endothel sejtrétegGBM rendellenességekMesangiális lerakódásokPodocitaris hasított rekeszizom rendellenességeiSubendoteliális/szubepitheliális lerakódásMások
ANCAElsődlegesIgANMYH9 betegségElsődleges GNWRN
EndokapillárisAlportHSPFabry betegségMBPSCD
TBMDEndokapilláris
HANACFélhold
? LPHS
Másodlagos GN
MásodlagosSLE
Anti-GBM betegségKrioglobulinémia
C3 glomerulopathia
CFHR5 nefropátiaFibrilláris lerakódás
Fibronektin
Fibrilláris
Immunotaktoid

A haematuria hagyományosan egyes glomeruláris megbetegedések jellemzőjének számít, anélkül, hogy ez a rövid és hosszú távú veseműködésre kihatna[3]. Az elmúlt évtizedben azonban új bizonyítékok számoltak be a vesebetegség progressziójára gyakorolt ​​negatív prognosztikai hatásokról mind a mikroszkópos[4], mind a makroszkópos haematuria[5] esetében. Tehát Vivante et al[4] arról számolt be, hogy 1 millió fiatal izraeli felnőtt esetében a tartós tünetmentes izolált mikroszkópos haematuria szignifikánsan összefüggésbe hozható a végstádiumú vesebetegség (ESRD) fokozott kockázatával 22 éves követés után. Ezenkívül a vesedonorok perzisztáló glomeruláris hematuriáját a proteinuria és a vesebetegség progressziójának fokozott kockázatával hozták összefüggésbe 2,3 évvel az adományozást követően[6].

Az akut vesesérülés (AKI) a súlyos makroszkópos haematuria gyakori szövődménye, incidenciája körülbelül 30% a bruttó makrohaematuria-rohamokban szenvedő IgAN-betegeknél[7,8], és körülbelül 20% a warfarinnal összefüggő nephropathiában (WRN)[9]. Gutiérrez et al[5] arról számolt be, hogy az IgAN-betegek körülbelül 25%-ánál nem állt helyre a szérum kreatininszintje a makroszkópos haematuria-asszociált AKI leállítása után. Ebben a vizsgálatban a makroszkópos roham időtartama volt a fontosabb prognosztikai tényező, amely meghatározta a vesefunkció hiányos helyreállítását. Hasonlóan a CFHR5-nephropathiában csaknem minden ESRD-t elérő férfibetegnél jelentkeztek makroszkópos haematuria epizódok a felső légúti fertőzések után gyermekkorban és serdülőkorban[10].

A legfontosabb vese-irányelvek, a Vesebetegség kimenetelének minőségi kezdeményezése és a Vesebetegség: A globális eredmény javítása ellentmondó tanácsokat adnak a haematuria kezelésével kapcsolatban. Ezek az irányelvek azt javasolják, hogy minden krónikus vesebetegségben (CKD) szenvedő beteget értékeljenek ki,[11,12], de a haematuria nem ismert a krónikus vesebetegség progressziójának kockázati tényezője, és nem javasolják további monitorozást vagy kezelést izolált mikroszkópos haematuria esetén glomerulonephritisben szenvedő betegeknél[13]. ]. Ugyanakkor elismerik, hogy az IgAN haematuria és minimális proteinuria esetén progresszív betegség[14], ami azt jelzi, hogy bár sok haematuriás beteg klinikai eredménye jó, a krónikus vesebetegségben szenvedő betegek életre szóló kockázata az adott alapbetegségtől függően emelkedhet.

Klinikai adatok és alapkutatási bizonyítékok arra utalnak, hogy a haematuria vesekárosodást okoz. Az akut tubularis nekrózis és az intraluminális obstruktív vörösvértestek a legjellemzőbb szövettani leletek AKI-ban makroszkópos hematuria során. A károsodás fő mechanizmusa a hemoglobin (Hb), a hem, a vas vagy más, a vörösvértestekből felszabaduló molekulák közvetlen tubuláris toxicitása. Feltételezték, hogy a vörösvértestek áthaladása a GFB-n keresztül az eritrocita citoszkeleton torzulását idézi elő, amely nem képes fenntartani a sejtes integritást, ami VVT-szakadáshoz vezet. Ennek eredményeként a mérgező molekulák általában bezáródnak a vörösvértestek és rsquos citoplazmájába, mint például a Hb, a hem vagy a vas, kikerülnek a vizelettérbe.

A Hb-t a megalin/cubilin komplex beépíti az epiteliális tubuláris sejtbe. A Hb a hámsejtek oxidáló körülményei között hemmé és globinná disszociál. A hem-oxigenáz-1 (HO-1) katalizálja a hem átalakulását biliverdinné, vassá és szén-monoxiddá[15]. Ekkor a bilirubin-reduktáz a biliverdint bilirubinná alakítja, és a vas feritinként raktározódik (1. ábra). A HO-1-et ma már antioxidáns és gyulladáscsökkentő tulajdonságokkal rendelkező védőmolekulaként ismerik fel a különböző szövetekben előforduló különféle sérelmek ellen[16].

A szabad hem szintén rendkívül mérgező. A plazmában és az intracelluláris membránokban a hem oxidálhatja a lipideket, denaturálhatja a fehérjéket és megzavarhatja a sejtek integritását[17]. A hem nagy mennyiségben vasforrás lehet, amely hipoxiás és nefrotoxikus inzultusok után oxidatív károsodást okoz[18]. A hem közvetve vesekárosodást is indukálhat proinflammatorikus hatásai révén, mint például a kemokinek, például a monocita kemoattraktáns protein-1 indukálása az NF-KB redox-érzékeny transzkripciós faktorában[15]. A hemoglobin hem csoportja szintén csökkentheti a nitrogén-monoxid hozzáférhetőségét, elősegítve az intrarenális érszűkületet és az ischaemiát[19]. Végül, a haematuria károsodásában szerepet játszó másik lehetséges mechanizmus összefüggésbe hozható a késleltetett diszmorf vörösvértestek és rsquos eliminációval, ami magyarázatot adhat a makrohaematuria által kiváltott AKI-ban szenvedő betegek elhúzódó felépülési időszakára.

A szabálytalan körvonalú és alakú, diszmorf vörösvértestek jelenléte a vizeletben a glomeruláris haematuria szinte patognómikus jelensége[20], és a vörösvértestek glomeruláris kapillárisból a vizelettérbe való kiáramlását jelzi. Ezért a glomeruláris haematuria a GFB diszfunkció vagy károsodás markere[21].

A GFB egy rendkívül összetett és speciális szerkezet[22,23], különböző alkotóelemekkel és sejttípusokkal, amely lehetővé teszi a víz, a kis és közepes méretű plazmaoldatok szabad permeabilitását, de megtartja a fehérjék és a nagyobb molekulák méretének és méretének megfelelően rendkívül speciális szelektivitást. molekulatömeg[24]. A GFB-nek öt fő összetevője van: (1) a vaszkuláris oldalról az endothel felszíni réteg, egy komplex glikozaminoglikán háló, amely az endothel réteget borítja, valamint a fenestrációk (2) az endothel sejt (3) a GBM (4) podociták a hozzá tartozó interdigitáló lábfolyamatok és speciális intercelluláris csomópontok, a &ldquoslit rekeszizom&rdquo és (5) végül a vizelet oldalon, a szubpodocita tér, a podocita sejttest és a lábnyúlványok között határolt terület (2. ábra). Ezen túlmenően a mezangiális sejt közvetetten hozzájárul a GFB szerkezetének szabályozásához és támogatásához a véráramlást és a glomeruláris kapilláris szerkezetét, valamint szabályozza a mezangiális mátrix forgalmát (2. ábra). A GFB integritását a három sejtalkotó sejttípus közötti jelátviteli kölcsönhatások összetett kölcsönhatása tartja fenn [24–26].

Úgy gondolták, hogy fiziológiás körülmények között az endotélium a fenestrációival (50-100 nm) molekulaméretű szitaként működik, amely önellátó ahhoz, hogy a vörösvértesteket (6,2-8,2 &mum) távol tartsa a GBM-től. Néhány betegségben, például a TBMN-ben, a fibrilláris lerakódásos betegségekben vagy a MYH9-hez társuló vesebetegségben, jellemzően ép endotéliummal azonban fellépő haematuria rávilágított a GFB komplex kulcsfontosságú integrációs szerepére, mint vörösvértest-szitára. Ezért továbbra sem világos, hogy a glomeruláris endothelium és rsquos pórusánál 100-szor nagyobb vörösvértestek hogyan jutnak át a GFB-n. Lehetséges, hogy egy sérült GFB réteg gyulladásos vagy kemotaktikus jeleket bocsáthat ki, amelyek elősegítik a vörösvértestek áthaladását ezen a rétegen, azonban a konkrét mechanizmusok még nem derültek ki.

Elsődleges és kórszövettani lokalizációja szerint a haematuriás rendellenességek a következőkre oszthatók: (1) Glomeruláris endothel sejt és felszíni réteg sérülései (2) primer és szekunder GBM rendellenességek (3) mesangialis lerakódással járó betegségek (4) szubendoteliális és szubepitheliális lerakódással járó betegségek ( 5) Podocitákkal kapcsolatos rendellenességek és (6) Vegyes (2. táblázat).

BetegségMolekuláris hibaPrevalenciaFő glomeruláris defektus Klinikai kifejezés
HaematuriaProteinuriaCKD progresszió
Genetikai rendellenesség
GFB szerkezeti károsodás
GBM szerkezeti sérülés
ALPORTX-kapcsolt: COL4A5 AR: COL4A3/COL4A41/50000GBMMHVáltozó100% körülbelül 20-30 év
TBMDCOL4A3/COL4A41%GBMMHÁltalában hiányzik20% CKD
HANACCOL4A13 családGBMMH vagy bruttóNincs leírvaVáltozó
Strukturális podocita károsodás
MYH9Nem izom miozin IIA nehéz lánc1:100000Egyik semMHVáltozóESRD fiatal felnőttkorban
Tárolási zavarok
Fibronektin GNFibronektin44 esetMesangiális/subendot60% MH93% változó fokozatESRD 20-60 éves korban
Fibrilláris10-30 nm-es fibrillákRitkaMesangial /GBMMH 47%-73% bruttó 5%Jelenleg 41-55% nephrosis50% ESRD néhány év alatt
Immunotaktoid>30 nm-es fibrillák10-szer ritkább, mint az FGNMesangialis/subepith/subendotMH 80%100%17% ESRD 3 év alatt
Fabry&rsquos betegségLizoszómális tárolás1:3100- 1:1600Az összes sejtMHÁltalában nefrotikusESRD 50 éves kor után
Komplement közvetített
C3 glomerulopathiaAlternatív út1-2 &szer 10 6 Mesangial/GBMMH 87%38%Változó
Gyulladásos rendellenességek
Autoimmun
ANCAAb vs endotélium10-20 &szer 10 6 EndothelMHVáltozóVáltozó
Anti GBMAb vs COL40,5-1 &szer 10 6 /évGBMMHVáltozóVáltozó
Fertőzések (endokapilláris)
Elsődleges GN (IgAN, membranoproliferatív, félhold)
IgANGalaktózhiányos IgA110%-16%MesangiálisMH mindig 75% bruttóRitka nephrosis Szokásos proteinuria20% ESRD 20 évvel a diagnózis után
Vegyes
WRNIsmeretlen16,5% nem CKD 33% CKDEgyik semÁltalában MHEgyik semGyorsított CKD progresszió
LPHSIsmeretlenIsmeretlenGBM (?)MH vagy bruttóHiányzik vagy minimálisGFR > 60

A glomeruláris endothel fenestrációk viszonylag nagy mérete ellenére fontos szerepet játszanak a GFB perm szelektivitásában a főként proteoglikánokból álló bevonó glikokalix réteg miatt[27]. A glomeruláris endothel sejt glikokalix és a hozzá tartozó felületi réteg a keringő fehérjék több mint 95%-át megtartja.

A glomeruláris endothel réteg a fő célpontja az ANCA-knak, amelyek megtámadják a kisereket okozó vasculitist, ami nekrotizáló és félhold glomerulonephritishez vezet. Az ANCA-vaszkulitisz éves incidenciája körülbelül 10-20 eset/millió ember, a legkorábbi életkor pedig 65-74 év[28]. Az ANCA indukálhatja a reaktív oxigénfajták és lítikus enzimek termelését és felszabadulását infiltrált neutrofilek[29], komplementrendszer által keresztül az alternatív útvonal[30], valamint az endothelsejtek, mint egy amplifikációs betegséghurok, ami endotélium lízist eredményez[31]. Az ANCA-vasculitis korai stádiumában az endothel lézió magyarázhatja a haematuria kialakulását, bár előrehaladott stádiumban a GFB súlyos károsodása magyarázhatja, amely általában minden rétegét érinti. Bár a haematuria klasszikusan az ANCA-ban a glomeruláris sérülések aktivitásának markere, egy közelmúltbeli jelentés szerint a perzisztáló haematuria (a mérőpálcikával meghatározott) 1 év utáni GFR-ben nem jelentkezik[32]. Ebben a vizsgálatban azonban a tartós haematuria az alacsony kiindulási GFR- és ANCA-státuszhoz társult.

Endothelsejt-károsodásról számoltak be endokapilláris glomerulonephritis (GN) és fertőzéssel összefüggő GN esetében is. Az elmúlt évtizedekben a fejlett országokban[33] tapasztalható csökkenő incidenciával az endokapilláris GN ma gyakrabban fordul elő törékeny betegeknél, például időseknél, alkoholistáknál és intravénás kábítószer-használóknál[34]. A tipikus megjelenés a nephritis szindróma vagy akut veseelégtelenség 15 nappal a fertőzés után[35], amelyben szinte mindig haematuria van jelen. Bár a prognózis gyermekek esetében kiváló, a felnőttek 20–74%-ánál a vesekárosodás továbbra is fennáll[34–37]. A keletkezett immunkomplexek in situ vagy a keringésből lerakódva súlyos gyulladásos választ indukálnak, ami a neutrofilek kemotaxisát és az endokapilláris hipercellularitását eredményezi, ami haematuriához vezet. Az endokapilláris GN-t a közelmúltban C3 glomerulopathiaként javasolták, mivel a nefrogén antigén kiváltja a komplement alternatív útvonalának aktiválását.

Amint arról korábban beszámoltunk, a GBM kulcsszerepet játszik a glomeruláris filtrációs gát permeabilitásában. A GBM IV-es típusú kollagén (COL4) és laminin sűrű gélszerű hálójából, valamint szulfatált proteoglikánokból áll. A GBM-sérülés okai az elsődleges GBM-rendellenességek, mint a kollagén nephropathiák és a másodlagos GBM-betegségek kategóriába sorolhatók, beleértve a GBM-et célzó betegségeket is.

Elsődleges GBM rendellenességek: A kollagén nefropátiák a fő elsődleges GBM rendellenességek. A IV-es típusú kollagén a GBM fő összetevője, így mutációi a kollagén hármas hélix rendellenes harisnya tekercselését idézik elő. A IV-es típusú kollagénnel összefüggő betegségek a leggyakoribb örökletes betegségek, amelyek izolált mikroszkopikus haematuria formájában jelentkeznek, ami a IV-es típusú kollagén génjeinek mutációiból ered [38], különösen annak alfa 3-as (COL4A3) és 4-es láncában (COL4A4)[39].

Az AS volt az első jellemezhető GBM kollagén-rendellenesség. Az AS prevalenciája 1 eset/50 000 élveszületés[10]. Az AS-esetek 85%-a az &alpha5 kollagénlánc (COL4A5) X-hez kötött mutációinak köszönhető, míg a fennmaradó 15%-ot a COL4A3 vagy COL4A4 autoszomális recesszív mutációi okozzák, bár az esetek kisebb részét autoszomális domináns sporadikus mutációnak írták le. . Az X-hez kötött AS-t szenzorineurális hallásvesztés, szemrendellenességek és progresszív nefropátia jellemzi. Ezek az elváltozások súlyosabbak a férfiaknál. Az autoszomális recesszív Alport ugyanazokkal a klinikai jellemzőkkel rendelkezik, mint az X-hez kötött AS, agresszívebb és korai CKD-károsodással (átlagéletkor ESRD esetén 21 év[40]), nemi preferencia nélkül, és jellemzően tünetmentes szülőkkel genetikailag rokon. Az elektronmikroszkópos vizsgálat a GBM vastagodását és elvékonyodását, valamint a lamina densa hasadását és lamellációját mutatja [41].Ezek a változások a magzati COL4A1 és COL4A2 perzisztens expresszióját eredményezik, mivel törékenyek és érzékenyek a proteázokra, lehetővé téve a vörösvértestek kijutását a vizelettérbe, és ezáltal tartós mikrohematuria kialakulását. A perzisztens mikrohematuria gyakrabban fordul elő gyermekeknél, gyakran makroszkopikus haematuria rohamokkal, ami azt sugallja, hogy súlyosbítja ezt a krónikusan károsodott GBM-et, bár ezt a promotert még nem azonosították. Fontos, hogy a betegek 90%-ánál a vesefunkció fokozatosan ESRD-ig csökken a negyedik évtized előtt [42,43].

Heterozigóta mutációk a COL4A3, COL4A4 vagy COL4A5 gének termelnek TBMN-t. A TBMN előfordulási gyakorisága 1%, és a GBM < 150 nm. A valamivel kompaktabb GMB a nem kollagén molekulák hiánya miatt törékenyebb, ami megmagyarázhatja a tartósan izolált haematuria kialakulását. A TBMN és rsquos tipikus megnyilvánulásai közé tartozik a mikrohematuria és minimális proteinuria vagy egyáltalán nem, normál glomeruláris filtrációs sebességgel és vérnyomással. A legutóbbi bizonyítékok azonban a korábbinál rosszabb prognózist mutattak[44], ahol a mikrohematuria proteinuriába, vese cisztákba[45] és CKD-be lép az összes beteg 26,6%-ánál és az 50 évesnél idősebb betegek 48%-ánál. [10,46].

A HANAC-szindróma egy rendkívül ritka szisztémás bazális membrán betegség, amely heterozigóta mutáció következtében alakul ki. COL4A1[47]. A HANAC-szindróma akár mikro-, akár makroszkópos rohamokkal jelentkezhet, amelyek a glomeruláris filtrációs ráta károsodásával és/vagy a vese cisztákkal kapcsolatosak vagy nem. Az ESRD-t még nem írták le, valószínűleg az eddig bejelentett betegek alacsony száma miatt. Az elektronmikroszkópos vizsgálat az alapmembránokon (beleértve a tubulusokat, kapillárisokat és GBM-et) megvastagodást és hasadást mutatott[48]. A mikro- és makroszkópos haematuria rohamok az extracelluláris mátrix rendellenes átalakulásának és az összes bazális membrán megváltozott összetételének az eredménye[47].

Bár az ágyékfájdalom haematuria szindróma (LPHS) nem kollagén nephropathia, ide soroljuk a TBMN és AS hisztolopatológiai jellemzőihez való hasonlósága miatt. A nőknél gyakrabban (70%), az LPHS visszatérő haematuria az élet harmadik évtizedére. Az elektronmikroszkópos vizsgálat abnormálisan vékony vagy vastag GBM-et mutatott[49]. Azt javasolták, hogy a GBM rendellenességei lehetővé teszik a vörösvértestek beszivárgását a vizelettérbe, ami intratubuláris elzáródást és vérrögképződést okoz. Az intratubuláris elzáródás intersticiális ödémát és intraglomeruláris hipertóniát válthat ki, amely további glomeruláris vérzést okoz.

Másodlagos GBM rendellenességek: Egyes rendellenességek támadják a GBM-et, például az Anti-GBM betegség és a C3 glomerulopathia. Az anti-GBM betegséget a IV-es típusú kollagén alfa3 láncú, nem kollagén 1 doménje elleni autoantitestek jellemzik. Az anti-GBM betegség előfordulási gyakorisága 0,5-1 eset/millió ember évente[50]. Feltételezték, hogy az anti-GBM betegséget kiválthatják a genetikailag hajlamos betegek (HLA-DRB1*1501 allél, valamint az FCGR és KLK család génjei[51]) környezeti vagy sejtes/humorális immunitási tényezők hatására. Ezek az autoantitestek megtámadják a GBM-et, megzavarva annak belső szerkezetét, megmagyarázva a szinte mindig jelenlévő haematuria-t, a nephritis szindrómával és a félholdas glomerulonephritissel.

Másrészt a közelmúltban bevezetett C3 glomerulopathia, mint glomeruláris patológia, C3 felhalmozódásával, és nincs szignifikáns immunglobulin lerakódás[52]. A C3 glomerulopathiát klinikailag haematuria, proteinuria és különböző fokú veseműködési zavarok kísérik[53]. A C3 glomerulopathia másodlagos a komplement alternatív útvonalának aberráns szabályozása miatt, akár genetikailag, akár szerzett. A C3 glomerulopathiák közé tartozik a sűrű lerakódási betegség (DDD), a C3 glomerulonephritis és a komplement H-faktorral kapcsolatosCFHR) génmutációk[54], például hibrid CFHR3-1 gén és egy belső megkettőzés a CFHR5 gén[55]. A C3 glomerulopathia és rsquos előfordulását 1-2 eset/millió emberre becsülték, nemtől függetlenül, bár a férfiaknál fokozott súlyosságról számoltak be. A DDD-t lineáris, hiperozmiofil, intramembránon belüli sűrű lerakódás jellemzi a lamina densa-ban, amely mind a tubuláris, mind a Bowman&rsquos kapszuláris alapmembránokra korlátozódik. Az esetek 87%-ában haematuria figyelhető meg, főleg mikroszkópos haematuria (68%)[53], és ez a követés során is fennáll. A haematuria a GBM károsodásával magyarázható, bár leírtak mesangiális, szubendoteliális és subepiteliális lerakódásokat is[53]. Két bizonyíték utal a C3 glomerulopathiát kiváltó fertőzés szerepére, egyrészt a makroszkopikus haematuria és a felső légúti fertőzések egyidejűsége CFHR5-nephropathiában[54], másrészt a megnövekedett antistreptolysin-O (az A csoportba tartozó Streptococcus baktériumok által termelt anyag) C3 glomerulopathiában[53]. Bár a proteinuria a legfontosabb prognosztikai tényező, az Athanasiou kohorszban[56] minden olyan betegnél, aki elérte az ESRD-t, makroszkópos haematuria rohamok jelentkeztek, amelyek lázas felső légúti fertőzésekkel jártak gyermekkorban és serdülőkorban.

Az IgAN a glomeruláris haematuria leggyakoribb oka. Az IgAN prevalenciája bizonytalan (10–16%)[57], és tartósan izolált mikroszkópos haematuria jelenléte jellemzi, alkalmanként felső légúti vagy gasztrointesztinális fertőzésekkel összefüggő makroszkopikus rohamokkal. A haematuria proteinuriával járhat, néha nefrotikus tartományban. Bár jóindulatúnak tekintik, a betegek közel 20%-ánál alakul ki ESRD a diagnózistól számított 20 éven belül[58–61]. A mesangiális hipercelluláris a szokásos szövettani lelet, mivel az intersticiális fibrózis és a tubuláris atrófia mértéke a vese kimenetelének legerősebb előrejelzője[62]. Azonban a haematuria és az rsquos szerepét az IgAN kimenetelével kapcsolatban nem kezelték megfelelően. A makroszkópos haematuria rohamok negatív hatással vannak a hosszú távú prognózisra[5], és bár az izolált MH-ban szenvedő IgAN-betegek prognózisáról számoltak be, a legnagyobb kohorsz közel 50%-a mutatta az MH spontán remisszióját a követés során[63].

Bár a haematuria mechanizmusa ismeretlen, a makroszkópos haematuria epizódjai során kimutatták a keringő immunkomplexek növekedését, amelyek galaktózhiányos IgA1 antiglikán antitestekkel komplexet alkotnak[64]. Ezek a keringő immunkomplexek a mezangiumban rakódnak le, indukálva a sejtproliferációt és számos gyulladásos mediátor (beleértve a citokinek, növekedési faktorok és az aldoszteron/angiotenzin) szekrécióját, amelyek felszabadulhatnak a vizelettérbe, és mind a podociták, mind a proximális tubuláris epiteliális sejtek károsodását idézik elő. 65]. Ezért ezek a közvetítők veszélyeztethetik a GBM szűrési akadály funkcióját, lehetővé téve a vörösvértestek kilépését. Ugyanezt a patológiás mechanizmust figyelték meg a Henoch-Schönlein purpurában (HSP), egy szisztémás rendellenességben, amelyet az IgAN és a leukocytoclasticus vasculitis egybeesése jellemez. HSP-ben szenvedő betegekben a galaktózhiányos IgA1 komplexek plazmakoncentrációja is megemelkedik, és a szubendoteliális lerakódások, félholdok, valamint a glomerulus-tuft nekrózis még gyakoribb, mint az IgAN-ban[65].

Sok nephropathiára jellemző a lerakódások jelenléte a szubendoteliális és szubepitheliális terekben, ami a GFB integritásának jelentős károsodását és ezáltal haematuria kialakulását idézi elő.

Elsődleges glomerulonephritis: A membránproliferatív, az endokapilláris és a félhold GN a fő elsődleges GN, amely a szubendoteliális és subepiteliális lerakódásokhoz kapcsolódik. Feltételezték, hogy a leukociták és az immunkomplexek súlyos gyulladásos választ válthatnak ki, aktiválva a glomeruláris sejteket és megzavarva a GBM szerkezetét, ami haematuria kialakulásához vezet.

Fibrillák lerakódási betegsége: A fibronektin glomerulopathia (GFND) egy ritka autoszomális domináns nefropátia a Fibronectin 1 mutációja miatt.FN1) gén expresszálódik[66]. Az FN1 az extracelluláris mátrix dimer glikoprotein alkotórésze. Mutációi megváltoztatták a fehérje-dimerek fibrillumait az extracelluláris mátrixban, és egyensúlyhiányt okoznak az oldható és az oldhatatlan fibronektin között, ami a mezangiumban és a szubendoteliális területen patognomonikus lerakódásához vezet [66,67]. A fibronektin-lerakódáson kívül IgA-, C1q- és fibrinogén-lerakódásokról számoltak be[68]. A GFND különböző életkorokban jelentkezhet, bár többnyire serdülőkorban vagy korai felnőttkorban. A GFND-t mikrohaematuria, proteinuria és magas vérnyomás jellemzi. A GFND-ben szenvedő betegek az élet második és hatodik évtizedétől ESRD-vé fejlődnek[66]. Ezeknél a betegeknél az ESRD kiújulhat vesetranszplantáció után[69].

A fibrilláris és immuntaktoid GN fibrillumok vagy mikrotubulusok lerakódását mutatta ki mezangiumban, GBM-ben vagy mindkettőben. Az immunotactoid GN megkülönböztethető a Fibrilláristól a jellemzően szélesebb, párhuzamos fókuszú szálak miatt. A patogenezis nem tisztázott, azonban az immunszuppresszióra adott válasza egy mögöttes autoimmun állapotra utalt[70]. A fibrilláris GN a mesangiumot és a lamina densa-t is beszivárgó lerakódásokat mutat [71], ami a GFB súlyos károsodását jelentette, amely lehetővé teszi a vörösvértestek kilépését, megmagyarázva a haematuria patogenezisét ezekben a betegségekben.

A podociták erősen specializált hámsejtek, interdigitálódó lábfolyamatokkal és speciális intercelluláris csomópontokkal, amelyeket &ldquoslit diafragma&rdquo-nak neveznek, és kulcsszerepet játszanak a GFB integritásában. A hasított rekeszizom és a lábfej folyamataiban részt vevő fehérjék mutációi főként a familiáris nephrosis szindrómához kapcsolódnak. A közelmúltban egy korábbi fajta családi jóindulatú haematuria, a MYH9-hez társuló vesebetegség genetikai variációjaként írtak le. MYH9 gén. MYH9 nem izom miozin IIA nehéz láncot kódol, amely az aktin-miozin és rsquos podocita kontraktilis apparátus egyik fő fehérje, amely szükséges a kapillárisfal integritásának fenntartásához[72]. Más autoszomális-domináns szindrómák, mint például a May-Hegglin-anomália és a Flechtner- és Epstein-szindrómák szintén tartalmaznak rendellenességeket MYH9 gén, összesen < 1:100000 [38] előfordulási gyakorisággal. MYH9 A génmutációk változó mértékű szenzorineurális süketséget és glomerulopathiát mutattak[73], általában afrikai embereknél. A haematuria és/vagy proteinuria jellemzően gyermekkor óta jelen van, és fiatal felnőttkorban ESRD-vé válik[74]. Az elektronmikroszkópos vizsgálat alkalmanként a GBM fokális megvastagodását és hasadását mutatta [74,75]. MYH9 A mutációk törékenyebb podocita- és kapillárisfalat hoznak létre, ami lehetővé teszi a vörösvértestek kilépését, megmagyarázva a haematuria jelenlétét[75].

A Fabry&rsquos betegségben haematuria is jelentkezik. A Fabry&rsquos betegség egy lizoszómális tárolási X-hez kötött rendellenesség, amely sokkal gyakoribb, mint eddig volt (1:3100[76]-1:1600[77]), és férfiaknál gyakoribb és agresszívabb. Ez a lizoszómális károsodás a globotriaozilceramid intracelluláris felhalmozódásához vezet szinte minden emberi sejtben[78]. A globotriaozilceramid felhalmozódása autofágiát indukál a podocitákban és az endoteliális sejtekben, ami fokális és szegmentális szklerózist, valamint a GFB jelentős károsodását eredményezi, ami proteinuriát és haematuria kialakulásához vezet[79].

A haematuria számos betegséggel jár, anélkül, hogy nyilvánvaló kórszövettani lelet igazolná. A warfarin coagulopathia (nemzetközi normalizált arány >gt 3,0) AKI-t, az úgynevezett WRN-t indukálhatja[80]. Az AKI-t a vörösvértestek intratubuláris elzáródása okozhatja glomeruláris vérzés során, bár az atheroemboliát[81], az intersticiális nephritist[82] és a warfarinnak a glomerulusra gyakorolt ​​közvetlen hatásait[83] is kimutatták. A valódi WRN előfordulási gyakoriság 16% lehet a nem CKD-ben szenvedő betegeknél és 37% a CKD-s betegeknél[84]. A WRN számos kockázati tényezőjét leírták, többek között: (1) aszpirinterápia (2) olyan gyógyszerek, amelyek növelik a glomeruláris hidrosztatikus nyomást, mint például a dihidropiridin kalciumcsatorna-blokkolók (3) az alacsony szérum albuminszint és (4) az egyidejű pangásos szívelégtelenség[85]. ]. A warfarin-coagulopathia K-vitaminnal történő korrekciója megakadályozza a WRN-t, és állatmodelleken elősegítheti a gyógyulást[86]. A WRN-ben a makroszkópos haematuria rohamokban szenvedő betegek 66%-a vesekárosodást mutat. A WRN összefüggésbe hozható a CKD felgyorsult progressziójával és a mortalitási rátával, bár ez összefüggésben volt a betegek társbetegségeivel[9]. Feltételezések szerint ez a warfarin iatrogén koagulopátia olyan betegeknél figyelhető meg, akiknél permeábilis és korábban &ldquofragilis&rdquo GFB (mint a szubklinikai GN vagy TBMD), lehetővé téve a vörösvértestek kilépését.

A sarlósejtes betegség (SCD) egy multiszisztémás rendellenesség, amely a &béta-globin mutáns gén homozigóta vagy heterozigóta öröklődésével jár, ami a hemoglobin S (HbS) termelődésében vezet, globális előfordulási gyakorisága 30/millió ember. A HbS abnormálisan sűrű és merev vörösvértesteket termel, amelyek hajlamosak sarlósodásra. Az SCD-s betegek 3-4%-ánál jelentkezett haematuria, bár ez gyakrabban fordul elő a sarlósejtes tulajdonságú heterozigótákon. A kanyargós sarlós vörösvértestek könnyen extravazálhatnak a glomerulus kapilláris falán, növelve a vér viszkozitását, elősegítve a mikrotrombusok képződését és az ischaemiás nekrózist a vasa rectában, ezáltal szerkezeti változásokat és haematuria-t indukálva[87]. A haematuria főként visszatérő és makroszkópos, és tünetmentes vagy fájdalmas lehet, mivel a vérrögök áthaladnak az ureteren. Ezen túlmenően a hemoglobinuria is gyakori ezeknél a betegeknél a visszatérő hemolitikus anaemia krízise miatt.

A legújabb eredmények a glomeruláris hematuria patogén szerepére utalnak vesebetegségben. Így a makroszkópos haematuria-asszociált AKI előfordulása IgAN nephropathiában a betegek jelentős részében a vesefunkció későbbi tartós károsodásával jár. A warfarin-terápia következtében fellépő túlzott antikoaguláns terápia makroszkópos hematuria-asszociált AKI-t is eredményezhet, és károsíthatja a veseműködést hosszú távon. Végül, a tartósan izolált mikrohematuria ESRD-t is indukálhat. A glomeruláris haematuria belső patogén mechanizmusa továbbra is tisztázatlan. A diszmorf húgyúti vörösvértestek a GFB működési zavarára vagy károsodására utaltak, mint a kóros folyamattal összefüggő lehetséges elváltozásra. A GFB diszfunkciójában és az ezt követő haematuria kialakulásában három lehetséges kóros mechanizmus lehet szerepet játszik, beleértve a GFB komponensek genetikai megváltozását, a toxikus molekulák aberráns lerakódását a GFB-ben és a fokozott gyulladásos választ. Mindazonáltal, bár azonosították a haematuria okozta vesekárosodásban szerepet játszó bizonyos mechanizmusokat, szükséges a hematuria új patogén hatásainak jellemzése az új lehetséges terápiás célpontok azonosítása érdekében. A jövőbeni tanulmányok ezen a területen nagy érdeklődésre tarthatnak számot.


Bevezetés

A glomeruláris hematuria, ha nem kíséri enyhe vagy súlyos proteinuria, a glomeruláris betegségek jóindulatú megnyilvánulása, amely nem befolyásolja a hosszú távú prognózist. Mindazonáltal a makroszkópos hematuria AKI-t indukálhat a vesetubulusokra gyakorolt ​​közvetlen káros hatással. Az ilyen makrohematuria által kiváltott AKI patogeneziséről és hosszú távú következményeiről rendkívül kevés információ áll rendelkezésre. A cikk célja a hematuria és a glomeruláris betegségek klinikai adatainak, valamint a hematuria-asszociált AKI patofiziológiájának áttekintése.


Indukálható nitrogén-monoxid-szintáz gátlás ciklofoszfamid által kiváltott vérzéses cystitisben patkányokban

A ciklofoszfamid (CP) egy daganatellenes szer, amelyet önmagában vagy más kemoterápiás szerekkel kombinálva alkalmaznak számos daganatos betegség kezelésére. A hemorrhagiás cystitis (HC) a CP egyik fő lehetséges toxicitása és dóziskorlátozó mellékhatása. A közelmúltban kimutatták, hogy az endogén gyulladásos mediátorok részt vesznek a cystitisben azáltal, hogy növelik a nitrogén-monoxid (NO) termelését a célszövetben. A vizsgálat célja az NO és a CP által kiváltott hemorrhagiás cystitis HC közötti kapcsolat értékelése volt patkányokban. Összesen 30 nőstény Spraque-Dawley patkányt 4 csoportra osztottak. Az 1. csoport kontrollként szolgált, három csoport egyetlen adag CP-t (100 mg/kg) intraperitoneálisan (i.p.) kapott: a 2. csoport csak CP-t kapott. A 3. csoport az NO-prekurzor L-arginint (80 mg/ttkg/nap), a 4. csoport pedig a szelektíven indukálható NO-szintáz (iNOS) inhibitort, az S-metil-izotiokarbamidot (SMT 20 mg/kg/nap) kapta ciklofoszfamid injekció előtt és azt követő napon. . A CP injekció súlyos hólyaggyulladást eredményezett. Az SMT, de nem az L-arginin, jelentős mértékben gátolta a CP által kiváltott hólyagkárosodást. Megállapítottuk, hogy az iNOS által termelt NO fontos közvetítő a CP által kiváltott cystitis patogenezisében.

Ez az előfizetéses tartalom előnézete, hozzáférés az intézményen keresztül.


Haematuria, mint prognosztikai tényező

A haematuria prognosztikai jelentőségét az IgA nephropathiában vizsgálták a leginkább. A legtöbb, de nem minden tanulmány negatív összefüggést talált a makroszkópos haematuria és a hosszú távú veseprognózis között (1. táblázat). Ez a negatív asszociáció azonban gyakran eltűnt a többváltozós elemzés során [36, 37]. A megfigyelés lehetséges magyarázata az, hogy a bruttó haematuria a legelterjedtebb a szövettani alosztályokban, minimális növekedéssel a mesangialis cellularitással vagy a fokális proliferatív glomerulonephritissel, de ritka eredmény olyan előrehaladott folyamatokban, mint a fokális szegmentális glomerulosclerosis-szerű és előrehaladott krónikus glomerulonephritis. [38]. Ezenkívül a súlyos haematuria rohamok gyakrabban fordulnak elő a betegség korábbi szakaszaiban, míg az előrehaladottabb stádiumokban fokozatosan ritkák, amikor a vesefunkció romlása kezdődik. Bár a kezdeti jelentés a kiindulási vesefunkció teljes helyreállítását írta le a haematuria-asszociált AKI-t követően IgA nephropathiában [29], egy nagyobb sorozat későbbi értékelése feltárta, hogy a betegek akár 25%-a sem tudja helyreállítani a kiindulási szérum kreatinint [1]. A többváltozós elemzés alapján a haematuria 15 napon túli időtartama volt az egyetlen szignifikáns prognosztikai tényező a nem teljes gyógyulásra vonatkozóan. Az életkor >55 év, a férfi nem, a magasabb kiindulási szérum kreatinin és a korábbi makroszkópos haematuria rohamok hiánya szintén jelentős kockázati tényezőt jelentett a veseelégtelenség fennmaradása szempontjából a makroszkópos haematuria eltűnése után egyváltozós elemzéssel [1]. Az idős betegek különösen hajlamosak a korábbi vesefunkciók hiányos helyreállítására az ilyen epizódok után. Az ATN szövettani súlyossága is jelentős kockázati tényező volt az AKI részleges felépülésében [1, 16].

Az ESRD előrejelzői IgAN-ban a

Szerző Év A tanulmány típusa NNyomon követés Morfológiai osztályozás Az ESRD jelentős előrejelzői
Nem Kor SCr/GFR Proteinuria Magas vérnyomás Szövettan Bruttó haematuria Mikrohaematuria
Espinosa 2009 Retrospektív kohorsz 19 kontra 40 1992–2006 Ad hoc Férfi b + b + b + b + b + b − b + b
D'Amico 2000 Felülvizsgálat 30 Tanulmányok Lee vagy Haas Férfi b + b + + + + − b ND
Haas 1997 Visszatekintő 244 1980–94 Haas ND ND + b + b + b + b − b ND
Frimat 1997 Leendő longitudinális 210 5.6 ± 2.6 Lee Férfi ND + + + + + b ND
Beukhof 1986 Visszatekintő 75 1967–83 ND ND + + + ND +
Szerző Év A tanulmány típusa NNyomon követés Morfológiai osztályozás Az ESRD jelentős előrejelzői
Nem Kor SCr/GFR Proteinuria Magas vérnyomás Szövettan Bruttó haematuria Mikrohaematuria
Espinosa 2009 Retrospektív kohorsz 19 versus 40 1992–2006 Ad hoc Férfi b + b + b + b + b + b − b + b
D'Amico 2000 Felülvizsgálat 30 Tanulmányok Lee vagy Haas Férfi b + b + + + + − b ND
Haas 1997 Visszatekintő 244 1980–94 Haas ND ND + b + b + b + b − b ND
Frimat 1997 Leendő longitudinális 210 5.6 ± 2.6 Lee Férfi ND + + + + + b ND
Beukhof 1986 Visszatekintő 75 1967–83 ND ND + + + ND +

(+), pozitív asszociáció ESRD-vel (-), negatív asszociáció ESRD NS-sel, nem szignifikáns ND, nincs adat/nem vizsgálták.


Oké, keményen növekszem, kidolgozott vagyok, alakom nagyon sportos. de nekem nehéz nagy tömeget szerezni. Az anyagcserém 28 évesen egekbe megy. Mondjuk nem rossz, a legtöbben kiabálnak velem, azt eszem, amit akarok, és nem nyerek. de ezek azok a személyek, akik nem igazán tudnak sokat a fitneszről vagy a megcélzott súlyról. Nem egy egészségtelen szar súly. Egyébként én általában csak tejsavót és kreatint használok.

A lényegre térve felvettem egy NO Fury-t.az olcsó ****, csak hogy lássam, mi volt a felhajtás, és ha egyáltalán csinálna valamit, talán beszerezném a jobb cuccot, és onnan mennék. Viszont azt olvastam itt és más oldalakon NINCS felhasználóktól (márkaválasztástól függetlenül), hogy többnyire nincsenek rossz mellékhatásai. Még kíváncsibb lettem, amikor láttam, hogy a mellékhatásokat illetően nem kap sok negatív kritikát. legalábbis amit eddig olvastam róla. Nem vagyok naiv, tudom, hogy a NOS és a NO ÉVEK óta a piacon van, de az utóbbi időben nagyon népszerű. Csak eddig nem nagyon gondolkodtam rajta.

Ma este azonban megtaláltam ezt a linket, amit sajnos nem tudok feltenni, b/c még nincs 30. figurák. Óóó. Csak bemásolom/beillesztem ide a cikket.

Miután csak ezt az egy dolgot elolvastam, kétszer is elgondolkodtat, hogy valaha is használjam-e a NO-t, függetlenül a típustól, márkától stb. Ha szán egy percet a cikk elolvasására, tudassa velem a gondolatait. Vannak barátaim, akik sok márkánál használnak NO-t, és ők nincsenek elég mélyen ahhoz, hogy megtapasztalják ezeket a hatásokat, azt hiszem. De a cikkben leírtak alapján ez nem szép.

gondolatok? Tanácsot vagy tisztánlátást, vagy mindkettőt kérek. Kösz!

A CIKK KEZDŐDIK:
A nitrogén-monoxid mellékhatásai vannak. Ismeretes, hogy neurotoxicitást vált ki az Olney-léziók kialakulása révén, amely az agy hátsó cinguláris és retrospeniális kéregének károsodása, amelyet rágcsálókon végzett kísérletben találtak.

A legtöbben ezt a típusú nitrogén-oxidot használják a testépítéshez. Számos olyan esetet észleltek, amikor ezzel a termékkel való visszaélés súlyos károsodást okozott a szervezetben, és gyakran akár halálhoz is vezetett. A megfigyelt mellékhatások a fejfájás és hányinger, fáradtság vagy rendkívüli gyengeség és hasmenés. Mások ájulásra, szapora szívverés miatti kellemetlen érzésre, szívdobogásérzésre, szájszárazságra, bőrirritációra és vízvisszatartásra is panaszkodnak. Számos mellékhatás is előfordulhat, ha ezt a terméket nagy dózisban veszik be, mint például zihálás, légzési problémák, viszketés, hányás, remegés, csalánkiütés, asztma, erős izzadás és remegés. Rendkívül nagy mennyiségű nitrogén-monoxid termelődik a szervezetben, amikor egy személy mérgezést szenved, ennek eredményeként az illető alacsony vérnyomása lesz, ami halálhoz vezethet. Amikor egy személy agyvérzést szenved, az idegsejtek nem kapják meg a megfelelő mennyiségű oxigént, így a szervezet nitrogén-oxidot termel, ami halált okoz.

A nitrogén-oxidnak ismertek hematológiai mellékhatásai, például methemoglobinémia, szív- és érrendszeri hatások, például hipotenzió, légzőszervi mellékhatások, például atelektázia és stridor, vesemellékhatások, például hematuria és metabolikus mellékhatások, például hiperglikémia. Egyéb jelentett mellékhatások az elvonási tünetek, szepszis, fertőzés, cellulitisz és fejfájás.

Általánosságban elmondható, hogy a nitrogén-monoxid használata olyan rövid távú hatásokat vált ki, mint például a mentális teljesítmény, az audiovizuális képességek és a kézügyesség rövid távú csökkenése. A hosszú távú expozíció B12-vitamin-hiányt, zsibbadást és reproduktív mellékhatásokat is okozhat. Biológiailag a nitrogén-oxidról ismert, hogy oxidáció útján deaktiválja a B12 kobalamin formáját, így természetesen az emberek, akik ki vannak téve ennek a terméknek vagy gáznak, a B12-vitamin-hiány tüneteit mutathatják, beleértve a szenzoros neuropátiát, myelopathiát és encephalopathiát. Egy olyan tanulmány is készült, amely a terhes nőstények szaporodási képességére gyakorolt ​​káros hatásokat mutat ki a terméknek vagy gáznak való krónikus expozíció eredményeként.


ANYAGOK ÉS METÓDUSOK

Baktériumok.

Az ebben a vizsgálatban használt uropatogén GBS-t egy 35 éves, nem cukorbeteg, azonosított rizikófaktorok nélküli nő tiszta vizeletéből tenyésztették ki, aki olyan tünetekkel jelentkezett az Alabamai Egyetemen, a Birminghami Kórházban (UAB) , beleértve a dysuriát, az egyetlen szervezet bakteriuriáját (> 100 000 CFU/ml), valamint a leukocita-észterázt és a pyuriát (� fehérvérsejtek [WBC]/μl nem centrifugálva), amelyeket a vizeletvizsgálat során észleltek. A GBS-t 37 °C-on tenyésztettük Todd-Hewitt (TH) agaron vagy Todd-Hewitt táplevesben (THB). A kapszuláris szerotipizálást, amely ezt az izolátumot III-as szerotípusként azonosította, a másutt leírtak szerint végezték el (84). A páciensből tenyésztett GBS ebben a vizsgálatban a Helsinki Nyilatkozat elvei szerint történt, az UAB Institutional Review Board (IRB) (X070722011) és a Griffith Egyetem Humán Etikai Bizottsága (HEC) jóváhagyásával (MSC/). 11/10/HREC). Az UAB IRB és a Griffith University HEC lemondott a konkrét tájékoztatáson alapuló beleegyezés szükségességéről. Egyes összehasonlító vizsgálatokban az UPEC CFT073 törzs prototípusát (ATCC 700928) használtuk, amelyet eredetileg pyelonephritisben szenvedő betegből tenyésztettek ki (43). Ezt a törzset többszörös patogenezis vizsgálatokban használták egereken, amint azt korábban leírtuk (32, 38, 82, 92).

A GBS húgyhólyag uroepitheliumhoz való tapadásának elemzése.

Kezdetben arra törekedtünk, hogy meghatározzuk, hogy ebben a vizsgálatban az uropatogén III-as szerotípusú GBS-izolátum képes-e kötődni a hólyagsejtekhez. in vitro. Ehhez kötődési vizsgálatokat végeztünk T24 és 5637 humán hólyag uroepiteliális sejtekkel (ATCC HTB-4, HTB-9). Harmincezer hólyagsejtet növesztettünk poli-d-lizinnel bevont többüregű kamrás tárgylemezeken (BD BioCoat) a korábban leírtak szerint (83). Fluoreszcein-izotiocianáttal (FITC) festett GBS-t (0,25 mg ml 𢄡 foszfáttal pufferolt sóoldatban [PBS], 15 perc, 37ଌ) adtunk hozzá (fertőzés többszöröse [MOI], 100 CFU sejt ). 2 óra elteltével az egyrétegű rétegeket PBS-sel öblítettük és 45 percig 3%-os paraformaldehiddel fixáltuk, az F-aktint pedig phalloidin Alexa Fluor 594-gyel (Molecular Probes) jelöltük, hogy a GBS-t a gazdasejt felszínével kolokalizáljuk. A DNS-t Hoechst 33258 nukleáris festékkel ellenfestettük. A sejteket Leica TCS SP2 konfokális mikroszkóppal tettük láthatóvá. Kvantitatív méréseket is végeztünk a GBS 5637 húgyhólyag uroepiteliális sejtjéhez való kötődésére vonatkozóan antibiotikum-védelmi tesztek alkalmazásával 30 percnél (kezdeti kötődés), 2 órában (kezdeti kötődés és invázió) és 24 órában (intracelluláris túlélés), amint azt máshol leírtuk (80). ). Röviden, 5 × 10 4-8 × 104 sejtet oltottunk be egy 24 lyukú szövettenyészettel kezelt lemez (Nunc) lyukaiba, 24 órán át 37 °C hőmérsékleten 5% CO-ban.2és uroepiteliális sejtenként 10 baktérium fertőzés többszörösével fertőztük meg. 30 perc vagy 2 óra elteltével az egyrétegű rétegeket PBS-sel öblítettük (ötször), és vagy az egyrétegű rétegeket feldolgoztuk a telepek számának meghatározására a tapadó GBS számának meghatározására, vagy friss tápközeget 100 U/ml penicillint, sztreptomicint és gentamicint adtunk hozzá a későbbi feldolgozáshoz. 24 órán belül az intracelluláris GBS mérésére (78, 81). Egyes vizsgálatokhoz a négy párhuzamos tenyészet felülúszóját 30 perc, 2 óra és 24 óra elteltével gyűjtöttük össze, és egy 8-célpontos multiplex fehérje vizsgálattal (Bio-Rad Laboratories, Ausztrália) vizsgáltuk az uroepiteliális sejtek szerepét a gazdaszervezet válaszaiban. GBS.

A GBS cystitis egérmodellje.

Nőstény C57BL/6 egereket (8-10 hetes) az Animal Resources Centertől (Ausztrália) és a Jackson Laboratories-tól (Egyesült Államok) vásároltunk. A vizeletet 24 órával a fertőzés előtt összegyűjtöttük, és mikroszkóposan és tenyésztéssel megvizsgáltuk, hogy kizárjuk azokat az egereket, akiknél korábban már máshol leírtak (85). Az egereket izofluránnal érzéstelenítettük, és a periurethralis területet 10%-os povidon–jóddal sterilizáltuk. Az egereket steril katéterrel katétereztük, és a provokáló oltóanyagot tartalmazó 40 µl PBS-t transzuretrálisan csepegtettünk a hólyagba. A kontroll egerek csak PBS-t kaptak. Az UPEC-vel való összehasonlításhoz az egerek egy másik csoportja ekvivalens dózisú CFT073 törzset kapott (azonos sejtszám alapján), amelyet 37 °C-on lizogén táptalajban növesztettek a korábban leírtak szerint (13). A vizeletet 22-24 óra elteltével gyűjtöttük össze a telepek számlálásához, majd az egereket elaltattuk, a hólyagokat eltávolítottuk, és homogenizáltuk a számláláshoz, vagy mikroszkóppal feldolgoztuk, hogy láthatóvá tegyük a GBS kötődését az uroepiteliális felszínhez. Eszkalációs dózisú kísérleteket használtunk a 90%-os fertőző dózis meghatározására (ID90) a GBS izolátum Reed és Muench módszere alapján (61). A legtöbb vizsgálatban körülbelül 3 × 10 9 CFU provokációs dózist alkalmaztunk, hacsak másként nem jelezzük. Egyes kísérletekben 30 perccel a fertőzés után egerekből hólyagokat gyűjtöttek, metszetekre osztották, és PBS-ben mostuk (ötször 5 perces mosás minden mosásban, 1 ml-ben, forgatással), majd a szokásos módon feldolgozták a kezdetben tapadó GBS számának meghatározására. a hólyag. Immunhisztokémiai (IHC) analízist végeztünk kettős hólyagokon is a lokális sejtinfiltrátumok szövettani értékelése céljából. Ez a feldolgozás standard IHC módszereken alapult, amelyeket patkány anti-egér Ly-6g-vel (GR-1) (eBiosciences, San Diego, CA) és kecske anti-patkány IgG-FITC konjugátummal (Southern Biotech, Birmingham, AL) végeztek. A FITC-festett GBS hólyag uroepitheliumon való eloszlásának megjelenítéséhez fluoreszcens disszekciós sztereomikroszkópiát végeztünk Olympus SZX16 mikroszkóppal, amely töltéscsatolt eszközzel (CCD) DP72 kamerával volt felszerelve. További világosmezős és epifluoreszcens mikroszkópos vizsgálatokat végeztünk AxioCam MRm Rev. 3 és MRc 5 kamerákkal felszerelt AxioImager M2 mikroszkóppal (Carl Zeiss, Ausztrália). Minden állatkísérletet a Griffith Egyetem Állat-etikai Bizottsága (MSC/14/08/AEC) és az UAB Intézményi Állatgondozási és Felhasználási Bizottsága (080708186) jóváhagyásával és etikai normáival összhangban végeztünk.

Vizelet növekedési vizsgálatok.

Annak megállapítására, hogy a GBS-növekedés a vizeletben befolyásolhatja-e a hólyagban élő organizmusok kolonizációs dinamikáját, vállaltuk, hogy in vitro vizeletnövekedési vizsgálatok. Emberi vizeletet hat egészséges felnőtt önkéntestől gyűjtöttek, akik nem szenvedtek húgyúti fertőzést, és nem estek át semmilyen antibiotikumos kezelésen az előző 2 hétben. Egyenlő térfogatú vizeletet egyesítettünk, szűrővel sterilizáltuk (0,45–003 milliárd cm-es pórusméretű szűrők), és felhasználásig (48 órán belül) 4–4,000 °C-on tároltuk. Növekedési vizsgálatokat is végeztünk egérvizelet felhasználásával. Duplikált 200-μl-es alikvotokat oltottunk be körülbelül 10 3 CFU GBS-sel, és 96 lyukú mikrotiterlemezeken növesztettük 37°C-on rázással (200 rpm), optikai sűrűséggel 600 nm-en (OD)600) 0 és 72 óra között került rögzítésre. A növekedési kísérleteket háromszor megismételtük, és egy reprezentatív kísérlet adatait mutatjuk be. A Griffith Egyetem etikai engedélyt adott az önkéntes alanyok felhasználására (Human Research Ethics Committee, MSC/11/10/HREC).

Elektronmikroszkópia.

A pásztázó elektronmikroszkópiához (SEM) teljes hólyagokat gyűjtöttünk az elaltatott egerekből 2 órával a transzuretrális fertőzés után, és azonnal fixáltuk 3% glutáraldehid𠄰,1 M kakodilát pufferben (pH 7,4), és 4 °C és 000 °C hőmérsékleten tároltuk a feldolgozásig. Friss pufferben történő mosás után a hólyagokat viaszlapokra tűzték, hogy megakadályozzák a hullámosodást, utófixálták 1%-os ozmium-tetroxidban, majd osztályozott etanolos sorozaton keresztül dehidratálták, és a kritikus pontot megszárították. A mintákat SEM csonkra szereltük, és platinával bevontuk a 8 kV-on működő JEOL 6300F SEM segítségével való megtekintéshez.

RNS izolálás és microarrays.

A teljes RNS-t GBS-fertőzött, UPEC-fertőzött és PBS-hólyagból (kontroll) izoláltuk a fertőzés után 2 órával és 24 órával, kezelési csoportonként és időpontonként öt egérből álló csoportmérettel. A teljes RNS-t TRIzol reagenssel (Gibco) izoláltuk a gyártó utasításai szerint, RNáz-mentes DNázzal kezeltük, és Bioanalyzer 2100 műszerrel (Agilent) analizáltuk. A Bioanalyzer analízisen átesett RNS-t mennyiségileg meghatároztuk, és 100 ng-ot cDNS-vé amplifikáltunk SuperScript III reverz transzkriptáz (Invitrogen) alkalmazásával, T7 promoterszekvenciával jelölt random hexamerekkel. A Microarray elemzéseket ötszörözve végeztük minden csoportra és időpontra, egérenként egy tömb használatával (minden tömb egyetlen hólyagot reprezentált). Ez a megközelítés a nem poololt mintákon alapuló nagyfokú statisztikai teljesítményt biztosított az egerek közötti eltérések figyelembevételéhez az egyes kezelési csoportokon belül. Minden kezelési csoportban és időpontban öt biológiai ismétlés (egerek) alkalmazását tartottuk előnyösebbnek, mint a technikai párhuzamos kísérleteket, amelyeket nem végeztünk el.

QRT-PCR.

A tömb adathalmazok lekérdezéséhez kvantitatív reverz transzkriptáz PCR-t (qRT-PCR) végeztünk a kiválasztott génekre (az 1. táblázatban felsoroljuk), amelyeket differenciálisan szabályozottként vagy változatlanként azonosítottunk a kezelést követően az array elemzés szerint. A cDNS amplifikációját (500 ng RNS amplifikálva) GeneAmp 7700 rendszerrel (Applied Biosystems) végeztük. A célgéneket a korábban leírt termikus ciklusos körülmények alkalmazásával amplifikáltuk (13, 83). Referenciagénként gliceraldehid-3-foszfát-dehidrogenázt (GAPDH) és β-aktint használtunk. Az egyes célgénekhez tartozó primer szekvenciákat a kiegészítő anyag S1 táblázatában mutatjuk be. Külön reakciókat hajtottunk végre annak biztosítására, hogy a referenciagén amplifikációjának hatékonysága megközelítőleg azonos legyen a célgénével. A célgének relatív expressziós szintjét a reakcióküszöb ciklus normalizálásával határoztuk meg (CT) értékeket a házvezetőnő génekhez, a GAPDH-hoz és a β-aktinhoz. ΔCT értékeket használtunk a 2.0 képletben − (ΔCT).

Asztal 1

qRT-PCR adatok kiválasztott génekre vonatkozóan, amelyek expressziója szignifikánsan megváltozott vagy változatlan volt 2 és 24 órával a hólyag fertőzés után GBS cystitis során a microarray-ek szerint

Cél gén aIdő (h)Átlagos CT ± SEM (n = 5) ΔCTHajtsa be a változástP b
EllenőrzésFertőzött
CXCL10234,111 ± 1,2933,351 ± 0,530.751.4110.110
2435.208 ± 3.1428,019 ± 6,827.18930.750.001
iNOS236,73 ± 1,2536,75 ± 2,02𢄠.02𢄡.0820.817
2435,73 ± 0,4432,26 ± 2,813.4711.920.001
CCL5228,37 ± 1,4028.425 ± 1.02𢄠.0551.40.153
2429.192 ± 1.1528.015 ± 1.211.1772.5250.003
CXCL5235,34 ± 0,8735,21 ± 2,450.131.130.717
2435,64 ± 0,5633,73 ± 1,801.914.960.001
CXCL9235,573 ± 0,8134,213 ± 3,571.361.7770.075
2436,753 ± 1,3231,950 ± 2,784.8036.4640.008
IL-1α231,717 ± 1,0530,737 ± 3,190.982.7880.001
2432,655 ± 0,9529.012 ± 2.053.64322.110.001
IL-1β227.766 ± 1.1125,343 ± 1,872.4237.580.001
2429,455 ± 2,3524.013 ± 3.155.44221.0960.001
IL-6233,47 ± 5,7030,77 ± 10,92.57.9130.001
2437,03 ± 1,3433,07 ± 6,223.1417.940.001
EMR1228.06 ± 0.1228,40 ± 0,380.41.0720.824
2434,48 ± 2,6833,14 ± 1,021.342.5210.124
CSF1R222,16 ± 0,0622,60 ± 0,020.441.510.396
2428.02 ± 1.327,22 ± 0,690.81.730.199
INFGr1233,097 ± 0,3333,110 ± 0,62𢄠.0131.1030.539
2435,340 ± 3,6833,477 ± 0,621.8631.120.480
Kaszpáz-3230,91 ± 0,6331,25 ± 1,17𢄠.34𢄡.0890.724
2430,92 ± 1,2730,64 ± 1.110.281.2930.3
β-Aktin219,938 ± 0,2220,256 ± 0,13𢄠.3180.8150.113
2420,26 ± 0,3120,36 ± 0,15𢄠.10.9370.127
GAPDH220.162 ± 0.320,662 ± 0,43𢄠.5𢄡.180.5
2420,531 ± 0,2320,352 ± 0,250.1791.1320.658

Statisztikai elemzés és bioinformatika.

Az adatok előfeldolgozásához a nyers tömbadatokat kvantilis normalizálással normalizáltuk, és a Bioconductor (http://www.bioconductor.org) affy csomagjában található RMA segítségével összegeztük, a máshol leírtak szerint (13). A differenciálisan kifejeződő géneket a MAANOVA csomag (http://www.bioconductor.org/packages/bioc/1.8/html/maanova.html) segítségével végzett adatok elemzésével azonosították. A GBS által kiváltott expressziós változások azonosításához zsugorodáson alapuló módszert alkalmaztunk t teszt a (9, 10) permutációval együtt. A szignifikáns gének listájának létrehozásához 0,1-es hamis felfedezési arányt (FDR) használtunk. A génosztály tesztelését a Bioconductor SAFE csomagjával végeztük, küszöbértékek alkalmazásával a jelentős útvonalak kiválasztásához (4). Mind a Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) (29, 48), mind a Gene Ontology (GO) (2) adatbázisokat használták arra, hogy a génosztályelemzésből jelátviteli hálózatot hozzanak létre. Mindkét eszköznél 0,1-es FDR-t használtak levágásként. A GoMiner-t a biológiai útvonalakon aktivált gének funkcionális csoportjainak elemzésére és a funkcionálisan kapcsolódó válaszok Venn-diagramjainak előállítására használták. Az InnateDB-t (http://innatedb.ca) a biológiai útvonalakon aktivált funkcionális csoportok integráló rendszerszintű elemzésére használták. Az innateDB-ben lévő útvonalak felülreprezentációs elemzését (ORA) szignifikáns génlisták, a hipergeometrikus algoritmus és a Benjamini Hochberg korrekciós módszer segítségével végezték el az ORA útvonallal. P érték szignifikancia beállítása 0,05.

Microarray adat hozzáférési szám.

A tömb-összehasonlításokhoz szükséges nyers adatkészleteket a Gene Expression Omnibus adatbázisban helyeztük el a regisztrációs szám alatt. <"type":"entrez-geo","attrs":<"text":"GSE27575","term_id":"27575","extlink":"1">> GSE27575 (http://www.ncbi .nlm.nih.gov/geo/).


A TMA-k életveszélyes entitások, és jellegzetes trombus-patológiájuk van, beleértve a glomeruláris kapillárisokat és/vagy arteriolákat (2T. ábra). Klinikailag a súlyos AKI gyakori tünet, míg a thrombocytopenia, a perifériás schistocyták, az emelkedett laktát-dehidrogenáz és a csökkent haptoglobin nem diagnosztikus lehet. atípusos hemolitikus szindrómát (aHUS) okoz. Az antifoszfolipid szindróma az aHUS kategóriájába tartozik, és a vesebiopsziás leletek a szubkortikális nekrózistól a fokális TMA-ig terjednek. A vesebiopsziás patológia megmagyarázza az akut megjelenést, súlyos esetekben hemorrhagiás ATN-t vagy diffúz ATI-t „fókuszos” trombotikus elváltozások mellett. A hangsúly itt a fokális TMA-n van, amely vagy egyetlen glomeruláris kapilláris trombózisban, vagy endoteliális duzzanatban és az arteriolák szűkületében nyilvánul meg, néha jóhiszemű trombusok nélkül. A TMA fő sérülése az endothel, az ATI pedig másodlagos ischaemia és vörösvértest-lízis következtében. A kis arteriolákban előfordulhatnak faltöredezett vörösvértestek, de ezek elegendőek a TMA hisztopatológiai diagnózisához.A preeclampsia, a szülés utáni TMA és a terhesség alatti vagy utáni aHUS egyéb okai jelentős AKI-okként merültek fel, amelyeket gyakran és véglegesen vesebiopsziával diagnosztizálnak a legjobban. A nefrológusok reakciója a vesebiopsziás leletekre ezekben az esetekben, jellemzően fiatal nőknél, meglepő lehet, majd kétértelműség alakulhat ki a megfelelő és azonnali, potenciálisan életmentő betegkezelést illetően [44]. Ez az összetett klinikai környezet hematológiai és nefrológiai konzultációt is igényel.

A jelenlegi COVID-19 világjárvány rávilágított a vírusok endotéliumra gyakorolt ​​káros hatásaira, amelyek a vesében TMA-ként, de szisztémásán (például stroke) is megnyilvánulnak [45].

Végül, de nem utolsósorban a kemoterápiás szerek és a monoklonális antitestek, pl. Az immunellenőrzési pont inhibitorok, amelyek a T-sejteken expresszált gátló receptorokat célozzák meg, és amelyeket jelenleg szolid tumorok vagy hematológiai rosszindulatú daganatok kezelésére használnak, egyre gyakrabban jelentenek a TMA által kiváltott AKI okaiként. Az ilyen betegeknél az AKI magyarázatára szolgáló egyéb mellékhatások közé tartozik az intersticiális nephritis és az általános ATI [46].

AKI patofiziológia

Az elmúlt néhány évtizedben az AKI hátterében álló patofiziológia jobb megértését tárták fel molekuláris és állatkísérletek, amelyek kimutatták az oxidatív stresszt [47], az endothel sérülést [48], a mitokondriális sérülést (lehetőleg a HIV-ben írják le) antiretrovirális gyógyszerekkel kezelt populációban. 49] és a veleszületett immunitás mint központi mechanizmus [50], amelyeket az alábbiakban röviden tárgyalunk.

Az AKI-t, amelyet korábban viszonylag jóindulatú folyamatnak tartottak jelentős hosszú távú következmények nélkül, ma a krónikus vesebetegség hosszú távú kockázati tényezőjének tekintik, különösen az idősebb betegeknél, akik egyidejűleg fennálló társbetegségei, különösen szepszisben szenvednek, és az intenzív osztályon lévő betegek 40-70%-át érinti. [ 51, 52].

A terápiás vagy tiltott drogok és toxinok külső sértéseket jelentenek. Számos gyógyszer okozhat ATI/ATN-t. A leggyakoribbak az antibiotikumok (pl. vankomicin), kemoterápiás szerek, angiotenzin-konvertáló enzim-gátlók, lítium és vény nélkül kapható kiegészítők. Hasonló tubulussérülési mintázatokról számoltak be olyan tiltott kábítószerekkel kapcsolatban, mint az opioidok és a szintetikus kannabinoidok (Spice, K2 stb.) [49, 53–55]. A gyógyszerek olyan gyakori okai az ATI/ATN-nek, hogy minden egyéb okon túlmenően a gyógyszerexpozíciót mindenekelőtt klinikailag ki kell zárni.

A fertőzés által kiváltott ischaemiás AKI érdekes mechanizmusai továbbra is megtalálhatók. Például a neutrofil extracelluláris csapdák a neutrofil arginin-deimináz 4-en keresztül károsítják a vesét [56, 57].

Az AKI állatmodellei

Jelentős mennyiségű kutatás irányult az AKI patofiziológiájának vizsgálatára és az AKI-terápiák állatmodellekben történő kifejlesztésére [58, 59]. Azonban ezen terápiák egyike sem vált klinikai ellátásba a mai napig. Az AKI egyik legszélesebb körben használt állatmodellje az ischaemia-reperfúziós modell. A meleg ischaemia-reperfúziós vizsgálatot jellemzően a vese érrendszerének egy- vagy kétoldali szorításával 30–45 percig, majd 1–2 napig tartó reperfúzióval végezzük [59, 60]. Ezt a modellt alaposan tanulmányozták sertéseken, kutyákon, nyulakon, patkányokon és egereken. A toxinexpozíció az AKI ismert oka, és az AKI patofiziológiájának tanulmányozására használták in vivo. A ciszplatin, a folsav, az arisztolochsav és a warfarin gyakori nefrotoxinok, amelyeket állatmodellekben AKI kiváltására használnak [51–65]. A rabdomiolízis egy specifikus klinikai állapot, amely állatokban reprodukálható az AKI glicerinmodelljének alkalmazásával. A patkányok hátsó lábizmojába fecskendezett glicerin gyors AKI-t és rabdomiolízist okoz [66, 67]. Az egyoldali ureterelzáródási modell egy reprodukálható állatmodell, amelyben egyetlen uretert kötnek le, ami mechanikai stresszt és gyulladást eredményez az egyik vesében. Ezt a modellt az AKI-tól a CKD-re való átmenet tanulmányozására használják. A szepszis az AKI másik jól dokumentált oka [51, 68]. Ennek a folyamatnak az állatokon történő tanulmányozása elvégezhető lipopoliszacharid injekcióval vagy a klinikailag relevánsabb vakbélligációs és szúrási (CLP) modell alkalmazásával [69, 70]. Bár a CLP modell inkább az emberi állapotra jellemző, kevésbé reprodukálható és technikailag nagyobb kihívást jelent. Az állatmodellek hasznos eszközt jelentenek az AKI patofiziológiájának vizsgálatára. Az ezen állatmodellek felhasználásával kifejlesztett új, klinikailag hasznos terápiák hiánya azonban rávilágít az emberi klinikai AKI és a preklinikai vizsgálatok közötti szakadásra. Ez aláhúzza azt a pontot, hogy a klinikai AKI emberekben változatos folyamat, többféle etiológiával és eltérő patofiziológiával, így az egyetlen kezelési lehetőség valószínűleg nem bizonyul hatékonynak.

AKI biomarkerek

A jelenlegi klinikai gyakorlat a szérum kreatinin- és vizeletkibocsátását használja fel az AKI-s betegek azonosítására, függetlenül a mögöttes etiológiától. Jelentős eredmény az AKI diagnosztikai kritériumok KDIGO általi szabványosítása [5, 71, 72]. Előfordulhat, hogy a szérum kreatininszintje nem emelkedik a sérülést követő napokig, megváltozhat a strukturális vesekárosodás nélküli esetekben, és a sérülés ellenére sem változhat jelentős vesetartalékkal rendelkező betegeknél [73–75]. Ezen ismert hiányosságok miatt az AKI számára troponinszerű biomarker szükséges. A remény a korai diagnózis megkönnyítése a jelenlegi kezelési stratégiák végrehajtása érdekében, amelyek célja a további sérülések megelőzése. A korai diagnózis megkönnyítheti azoknak a terápiás szereknek a felülvizsgálatát, amelyek korábban sikertelennek bizonyultak a klinikai vizsgálatok során, valószínűleg a kreatinint a terápia megkezdéséhez használt késleltetett kezelés miatt.

Az elmúlt évtizedben jelentős erőfeszítések történtek az érzékeny és specifikus vizelet és plazma AKI biomarkerek azonosítására. Az AKI biomarkerek funkcionálisak (cisztatin C), károsodáshoz (mioinozitol oxigenáz, N-acetil-β-glükózaminidáz, glutation S-transzferáz, alkalikus foszfatáz), gyulladásosak (interleukin-18, -6, -10 és -5 ), a sérülést követően a proximális tubulusban (KIM-1), a distalis tubulusban a sérülést követően (neutrofil zselatináz-asszociált lipocalin) vagy a sejtciklus-leállás indikátorai (szöveti inhibitor metalloproteináz-2 és inzulinszerű növekedési faktort kötő fehérje-7) ) [ 76, 77]. Az egyes biomarkerekre vonatkozó szabványosított vizsgálatok kiterjedt kutatása és fejlesztése ellenére az AKI biomarkerek túlnyomórészt kutatási felhasználásra korlátozódtak, és még nem hatotta át a klinikai gyakorlatot. Ennek az eltérésnek az egyik oka a kreatinin használata a biomarker minősítés hibás aranystandardjaként [76]. Egy másik hátrányuk, hogy nem specifikusak a vesebetegségre [7]. Az egyik biomarker, a mio-inozitol-oxigenáz a jelentések szerint a veseszövetre korlátozódik, és ígéretesnek mutatkozik, mint a vese-specifikus proximális tubuláris károsodás indikátoraként, de még nem esett át jelentős vizsgálaton [76]. Más kritériumok, például a dialízis szükségessége és a mortalitás alkalmazása segített a klinikai értékelést kiegészítő biomarkerek azonosításában [78–80]. E hiányosságok ellenére a legújabb tanulmányok a biomarkerek lehetséges szerepét jelzik a valódi AKI és a prerenális azotemia, a hepatorenalis szindróma és a cardiorenalis szindróma megkülönböztetésében [78]. A jövőbeni tanulmányoknak fel kell mérniük az AKI biomarkerek azon képességét, hogy javítsák a betegek kimenetelét, hogy széles körben alkalmazzák őket a klinikai gyakorlatban [77].


HO-1 Indukció által Selaginella tamariscina A kivonat gátolja a gyulladásos választ a lipopoliszacharidokkal stimulált RAW 264.7 makrofágokban

Selaginella Herba a szárított, légi része Selaginella tamariscina (P. Beauv.) Tavasz, és Koreában amenorrhoea, hasi fájdalom, fejfájás és hematuria kezelésére használták. Tudományos bizonyítékok azonban a gyulladáscsökkentő hatásáról és hatásmechanizmusáról Selaginella tamariscina hiányzik. Ezért a jelen vizsgálatot a gyulladásgátló és antioxidáns hatások vizsgálatára végeztük Selaginella tamariscina etanolos kivonatot (STE) a lipopoliszacharidok (LPS) által kiváltott gyulladásos válaszok ellen, és azonosítja a felelős molekuláris mechanizmust. Az STE-t 70%-os etanolban melegítéssel állítottuk elő, és minőségét HPLC-vel igazoltuk. Az STE dózisfüggően gátolta a gyulladásos mediátorok (NO és PGE) termelődését2) és proinflammatorikus citokinek (IL-1β és IL-6) LPS-stimulált RAW 264.7 sejtekben. Az STE jelentősen elnyomta a MAPK-k foszforilációját, az IκB-αés NF-κB és az NF- nukleáris transzlokációjaκB LPS stimulációval indukált. Ezenkívül az STE jó szabad gyökfogó aktivitást mutatott, és megakadályozta az LPS általi ROS-generációt. Az STE emellett felszabályozta az Nrf2 és a HO-1 expresszióját, és elősegítette az Nrf2 nukleáris transzlokációját. Összességében az STE-ről azt találták, hogy gyulladásgátló és antioxidáns hatást fejt ki a RAW 264.7 makrofágokon, és úgy tűnt, hogy a mechanizmus magában foglalja a MAPK, NF-κB és Nrf2/HO-1 jelátviteli útvonalak. Ezek az eredmények azt sugallják, hogy az STE hasznos lehet a gyulladásos betegségek megelőzésében vagy kezelésében, és tudományos bizonyítékokkal szolgálhat, amelyek alátámasztják a gyógynövényes receptek vagy az új természetes termékek fejlesztését.

1. Bemutatkozás

A gyulladás az immunrendszer káros ingerekre adott válaszának megnyilvánulása, például fizikai károsodások vagy kórokozók által okozott károsodások, és a sérült terület fokozott véráramlása, hőség, bőrpír, duzzanat és fájdalom jellemzi [1]. A gyulladásos válaszok összehangolt kommunikációt foglalnak magukban a különböző immunsejtek (makrofágok, dendritikus sejtek, T-sejtek, B-sejtek és mások) és a vérerek között molekuláris jelek komplex kaszkádján keresztül [2]. A mintázatfelismerő receptorok, például a makrofágokban lévő Toll-like receptorok (TLR-ek) felismerik és kapcsolatba lépnek a kórokozókkal összefüggő molekuláris mintázatokkal (PAMP), mint például a lipopoliszacharid (LPS, a Gram-negatív baktériumok külső membránjának fő összetevője, amely a TLR4-hez kötődik) ), és ezek a kölcsönhatások a mitogén által aktivált protein kináz (MAPK) és a nukleáris faktor-kappa B (NF-) aktiválódását eredményezik.κB) intracelluláris jelátviteli útvonalak, amelyek gyulladásos mediátorok és proinflammatorikus citokinek szekréciójához vezetnek [3]. Ha a gyulladást nem kontrollálják, az előrehaladhat és krónikussá válhat, a szisztémás vagy krónikus gyulladás pedig számos betegség, köztük a rák, a degeneratív betegségek és az elhízás kiváltó oka lehet, és hajlamosabbá teheti az embereket az öregedésre és a betegségekre [4, 5]. Ennek megfelelően fontos, hogy a gyulladást azonnal kezeljék.

Nem szteroid gyulladáscsökkentő szereket (NSAID-okat), például naproxent, ibuprofént és aszpirint gyakran írnak fel gyulladásra, de hosszú távú használatuk gyomorfekélyt, vesekárosodást, stroke-ot vagy szívrohamot okozhat [6]. A kortikoszteroidok a szteroid hormonok egy osztálya, amelyek megakadályozzák a gyulladás hátterében álló számos mechanizmust, és számos gyulladásos állapotra írják fel őket. A kortikoszteroidoknak azonban vannak mellékhatásai is, amelyek közé tartozik a Cushing-szindróma, a magas vérnyomás, a hiperglikémia, a csontritkulás és a kötőszöveti gyengeség [7]. Hatékonyságuk és biztonsági profiljuk miatt a növényi gyógyszereket egyre gyakrabban használják gyulladáscsökkentő szerként vagy kiegészítőként, és sok kutatás folyik az új természetes gyógyszerek azonosítására.

Selaginella Herba (Koreában Kwon Baek vagy Boo Cheo Son néven ismert) a szárított, légi része Selaginella tamariscina (P.Beauv.) Tavasz, lágyszárú örökzöld, a Selaginellaceae család tagja [8]. Mivel úgy gondolják, hogy serkenti a vérkeringést és helyreállítja a menstruációs áramlást, Koreában régóta használják amenorrhoea, hasi fájdalom, fejfájás és asztma kezelésére [9]. A terápiás hatékonyságába vetett hit Selaginella tamariscina klinikai megfigyelések vagy Dongui Bogam, a koreai orvoslás reprezentatív szövege támasztja alá, de hiányoznak a bizonyítékokon alapuló adatok. A legújabb tanulmányok ezt bizonyították Selaginella tamariscina antiallergiás, antihiperglikémiás és rákellenes hatásai vannak [9–12]. Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a fő bioaktív összetevők jelen vannak a Selaginella tamariscina olyan bioflavonoidok, mint az amentoflavon, hinokiflavon, izokriptomer, sotetsuflavon és sumaflavon [13, 14]. Továbbá, amentoflavon, szumaflavon és lignán származékok izolált Selaginella tamariscina kimutatták, hogy gátolják az indukálható nitrogén-monoxid-szintáz (iNOS) indukcióját és a nitrogén-monoxid (NO) termelődését [13, 15, 16]. Az irodalomban azonban nem áll rendelkezésre információ a teljes kivonat gyulladáscsökkentő vagy antioxidáns hatásáról Selaginella tamariscina. Ezért jelen tanulmányban a hatásait vizsgáltuk Selaginella tamariscina kivonatot (STE) LPS-stimulált RAW 264.7 makrofágokon, és igyekeztek tisztázni a felelős mechanizmust.

2. Anyagok és módszerek

2.1. Vegyszerek és reagensek

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) készletek IL-1-hezβ és az IL-6-ot az Ab Frontiertől (Szöul, Korea) és a PGE-től vásároltuk2 az R&D Systems Inc.-től (Minneapolis, MN, USA) vásárolták. Elsődleges antitestek, anti-COX-2, anti-HO-1, anti-iNOS, anti-IκB-α, anti-p-IκB-α, anti-NF-κA B (p65), az anti-Nrf2 és a másodlagos antitesteket a Santa Cruz Biotechnology-tól (Santa Cruz, CA, USA) vásároltuk. A többi elsődleges antitestet a Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA) szállította. A dimetil-szulfoxidot (DMSO) a Junsei Chemical Co.-tól (Tokió, Japán) vásároltuk. LPS, amentoflavon, 3-(4,5-dimetil-tiazol-2-il)-2,5-difenil-tetrazólium-bromid (MTT), Griess-reagens, 2,2-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH), 4,6- A diamidino-2-fenil-indolt (DAPI) és más reagenseket a Sigma-Aldrich-től (St. Louis, MO, USA) vásároltuk.

2.2. STE előkészítése

Szárított Selaginella tamariscina (P.Beauv.) Tavasz (Selaginella Herba, amelyet Koreában Kwon Baek vagy Boo Cheo Son néven ismernek) az Omniherbtől (Daegu, Korea) vásárolták, és Sun-Dong Park professzor (Dongguk University, Gyeongju, Korea) hitelesítette. Az utalványmintákat (DUMCKM2015-103) a Dongguk Egyetem Koreai Orvostudományi Kollégiumában helyezték letétbe. A légi részeket (100 g) 8-szoros térfogatú 70%-os etanollal (800 ml) 80 °C-on 4 órán át extraháltuk. Az extraktumot ezután szűrtük, rotációs vákuumbepárlóval betöményítettük (EYELA, Japán), liofilizáltuk fagyasztva szárítóval (EYELA), és 4 °C-on tároltuk. A kapott liofilizált extraktum hozama 16,5 tömeg/tömeg% volt szárítva Selaginella tamariscina.

2.3. Nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC)

Az STE-t Dionex Ultimate 3000 HPLC rendszerrel (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) bináris oldószeradagoló szivattyúval, vákuumgáztalanítóval és diódasoros spektrofotometriás detektorral elemeztük amentoflavon (Sigma-Aldrich) tartalmára vonatkozóan. Az elválasztást VDSpher EC-C18 oszlopon (4,6 × 250 mm, 5 mm) végeztük. μm, VDS optilab, Németország) 30 °C oszlophőmérsékleten. A mozgófázis 0,3% trifluor-ecetsav (A) és acetonitril (B) keverékéből állt, és a gradiens elúciót a következő ütemezés szerint végeztük: 0-1 perc, 10% B 1-25 perc, 10-50% B 25- 35 perc, 90% B 35-40 perc és 90-10% B. Az áramlási sebességet végig 0,8 ml/perc értéken tartottuk, és az injekció térfogata 10 μL. A vizsgálatokat 340 nm-en követtük, és a kromatográfiás adatokat Chromeleon 6.8 szoftverrel dolgoztuk fel.

2.4. Sejtkultúra és sejtéletképességi vizsgálat

A RAW 264.7 sejteket (egy egér makrofág sejtvonal) az American Type Culture Collection-től (ATCC, Manassas, VA, USA) szereztük be, és Dulbecco's Modified Eagle's Medium (WELGENE, Gyeongsan, Korea) táptalajban tenyésztettük, kiegészítve 10% magzati borjúszérummal ( WELGENE), 100 E/ml penicillin és 100 μg/ml sztreptomicin (Gibco, Grand Island, NY, USA). A sejteket 37 °C-on tartottuk párásított 95% levegőben és 5% CO-ban2 inkubátor.

A sejtek életképességét MTT vizsgálattal értékeltük. Röviden, RAW 264.7 sejteket szélesztettünk 1 × 104 sejt/lyuk sűrűséggel egy 96 lyukú tenyésztő lemezre, 24 órán át inkubáltuk, és DMSO-val (kontroll) vagy különböző koncentrációjú STE-vel (10-300) kezeltük. μg/ml) 24 órán át. Az életképes sejteket MTT-oldattal (végső koncentráció 0,2 mg/ml) festettük 3 órán át, és a képződött formazán kristályokat 100 ul hozzáadásával feloldottuk. μL DMSO. Az abszorbanciákat 540 nm-en mértük mikrolemez-leolvasóval (Genios, Tecan, Ausztria).

2.5. Nitrit vizsgálat

A tenyésztett makrofág felülúszókban lévő nitritkoncentrációt Griess-reagens teszttel határoztuk meg. Röviden, RAW 264.7 sejteket szélesztettünk 4 × 105 sejt/lyuk arányban 24 lyukú tenyésztő lemezekre, amelyeket különböző koncentrációjú STE-vel (10-300) előkezeltek. μg/ml) 1 órán át, majd LPS-sel (1 μg/ml) 24 órán át. Griess-reagens [A oldat: 1% szulfanilamid 5% foszforsavban, B oldat: 0,1% N-(1-naftil)-etilén-diamin-dihidroklorid vízben

(w/w)] ezután egyenlő térfogatú sejtfelülúszókkal kevertük össze, és az elegyeket szobahőmérsékleten 10 percig állni hagytuk. Az abszorbanciákat 540 nm-en mértük mikrolemez-leolvasóval.

2.6. ELISA

A RAW 264.7 sejteket 24 lyukú tenyésztőlemezekre oltottuk 4 × 105 sejt/lyuk arányban, STE-vel előkezeltük 1 órán át, majd LPS-sel stimuláltuk (1 μg/ml) 24 órán át. Gyulladásos citokin (IL-1βIL-6 és PGE2) a tenyészet felülúszójában a koncentrációkat ELISA kitekkel határoztuk meg a gyártó protokollja szerint, és az egyes citokinekre vonatkozó standard görbéből számítottuk ki.

2.7. DPPH szabad gyökfogó vizsgálat

Az STE DPPH szabad gyökfogó aktivitását Moreno, Isla, Sampietro és Vattuone [17] által leírtak szerint értékelték, némi módosítással. Röviden, az STE különböző koncentrációi (0, 10, 100, 200 vagy 300 μg/ml) 0,45 ml 50 mM Tris-HCl pufferhez (pH 7,4), majd ezeket a keverékeket 1 ml 0,1 mM etanolos DPPH-hoz adjuk. A keverékeket ezután vortexeljük, és sötétben 30 percig szobahőmérsékleten inkubáljuk, majd az abszorbanciákat (absz.) 517 nm-en mérjük mikrolemez-leolvasóval. A DPPH gyökfogó aktivitását a következőképpen számítottuk ki.

2.8. Az intracelluláris reaktív oxigénfajok mérése

Az intracelluláris reaktív oxigénfajták (ROS) szintjét DCFH-DA festéssel elemeztük [18].Röviden, a RAW 264.7 sejteket egy 96 lyukú fekete lemezre oltottuk 1 × 105 sejt/ml koncentrációban, és LPS-sel inkubáltuk STE jelenlétében vagy hiányában (10-300). μg/ml). A közeg eltávolítása után 10 μM DCFH-DA-t foszfáttal pufferolt sóoldatban (PBS) adtunk minden egyes lyukhoz, és a lemezt 30 percig 37 °C-on inkubáltuk. A fluoreszcencia intenzitását 480 nm gerjesztés/530 nm emisszió mellett fluoreszcens mikrolemez-leolvasóval (Spectra Gemini, Molecular Devices) mértük.

2.9. Western Blotting

A teljes sejtfehérjéket radioimmunprecipitációs vizsgálati (RIPA) pufferrel (Thermo Scientific, Rockford, IL, USA) extraháltuk, amely proteáz és foszfatáz inhibitor koktélokat tartalmazott (GenDEPOT, Barker, TX, USA). A citoplazmatikus és nukleáris lizátumokat a NE-PER® nukleáris és citoplazmatikus extrakciós reagenskészlettel (Thermos Scientific) választottuk el a gyártó protokollja szerint. Röviden, egyenlő mennyiségű fehérje (30-50 μg) 10%-os nátrium-dodecil-szulfát-poliakrilamid gélelektroforézissel elválasztottuk és polivinilidén-difluorid membránokra (EMD Millipore, Bedford, MA, USA) vittük át, amelyeket ezután 5% sovány tejet tartalmazó PBST-ben blokkoltunk 1 órán át, és elsődleges antitestekkel inkubáltuk. (1:1000) egy éjszakán át 4°C-on. Három PBST-vel végzett mosás után torma-peroxidázzal konjugált másodlagos antitesteket (1:5000) adtunk hozzá, és a membránokat 1 órán át szobahőmérsékleten inkubáltuk, majd öblítettük. A detektálást fokozott kemilumineszcenciás prime oldattal (Amersham Bioscience, Buckinghamshire, Egyesült Királyság) végeztük. A sávokat Fusion Solo 2 M kemilumineszcenciás képalkotó rendszerrel (Vilber Lourmat, Franciaország) tettük láthatóvá.

2.10. Immunfluoreszcens festés

A RAW 264.7 sejteket STE-vel kezeltük (300 μg/ml) LPS hiányában vagy jelenlétében (1 μg/mL) 18 mm-es fedőüvegeken 12 lyukú tenyésztőlemezeken, 3-szor öblítettük PBS-sel, 100%-os metanollal fixáltuk 10 percig, majd újra öblítettük. A sejteket ezután 1%-os szarvasmarha szérumalbuminnal blokkoltuk, majd NF-vel kezeltük.κB p65 vagy Nrf2 antitest (1:200), és egy éjszakán át 4 °C-on inkubáltuk. PBS-sel végzett alapos mosás után a sejteket fluoreszcein-izotiocianáttal (FITC) konjugált másodlagos antitesttel (1:2000 Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) inkubáltuk 1 órán át szobahőmérsékleten, majd DAPI-val (1:1000) ellenfestettük. Miután a fedőüvegeket VECTASHIELD® HardSet™ fakulásgátló rögzítőközeggel (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) üveglemezekre szerelték, a fluoreszcens képeket fordított fluoreszcens mikroszkóppal (ECLIPSE Ts2-FL Nikon, Tokió, Japán) rögzítettük monokrómmal. fényképezőgép (DS-Qi2, Nikon).

2.11. Statisztikai analízis

Az eredményeket legalább három független kísérlet átlaga ± standard deviációja (SD) fejezi ki. A statisztikai szignifikanciát egyutas ANOVA-val határoztuk meg Tukey többszörös összehasonlító tesztjével, GraphPad Prism szoftverrel (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). A statisztikai szignifikanciát elfogadták

3. Eredmények

3.1. Az STE hatása a gyulladásos mediátorokra LPS-stimulált RAW 264.7 makrofágokban

MTT-tesztet használtunk annak igazolására, hogy az STE-nek nincs toxikus hatása a RAW 264.7 makrofágokra. Azt találtuk, hogy az STE 10 és 300 közötti koncentrációkban μg/ml nem volt hatással a sejtek életképességére (1(a) ábra). Az STE LPS-stimulált RAW 264.7 makrofágokra gyakorolt ​​gyulladáscsökkentő hatásának vizsgálatára NO és PGE mennyiségét mértük.2 médiumba választódik ki. Amint az 1(b) és 1(c) ábrán látható, STE előkezelés 100, 200 vagy 300 °C-on μg/ml szignifikánsan csökkentette az LPS által kiváltott NO és PGE növekedést2 váladék. Különösen a 300-as előkezelés μg/mL STE gátolta ezeket az LPS-indukált növekedéseket a nem kezelt kontrollhoz hasonló szintre. Továbbá az iNOS és a COX-2 Western blot vizsgálata azt mutatta, hogy az LPS által kiváltott iNOS növekedést dózisfüggően gátolta az STE. Az LPS által kiváltott COX-2 növekedést csak 300 gátolta μg/ml STE (1(d) ábra). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy az STE hatékonyan gátolta a gyulladásos mediátorokat LPS által kiváltott gyulladásos állapotokban in vitro modell.

3.2. Az STE hatása a proinflammatorikus citokinek LPS-indukált szekréciójára

Az STE hatásának vizsgálata a proinflammatorikus citokinek LPS-indukálta szekréciójára, ellenőriztük az IL-1-et.β és IL-6 szinteket ELISA kitekkel. Ahogy a 2. ábrán látható, az LPS-stimuláció jelentősen megnövelte az IL-1 szintjétβ és IL-6 255,8 ± 30,6 pg/ml-re (P < 0,01 a kontrollhoz képest 9,9 ± 0,8 pg/ml) és 764,5 ± 37,2 pg/ml (P < 0,01 a kontrollhoz képest 24,9 ± 2,6 pg/ml). Az STE előkezelés azonban hatékonyan gátolta az LPS-indukálta citokinek szekréciót (2(a) és 2(b) ábra). Különösen 300-as koncentrációban μg/mL STE erős szuppresszív hatást mutatott az IL-1-reβ és IL-6 szekréció (26,9 ± 1,9 pg/ml, illetve 57,3 ± 10,1 pg/ml) (2(b) ábra).

3.3. Az STE hatása a MAPK és az NF aktiválásáraκB Jelzési útvonalak

MAPK-k (ERK1/2, JNK és p38) és NF-κA B a gyulladás fontos transzducerei [19]. Az STE gyulladáscsökkentő hatásáért felelős mechanizmusok megértéséhez Western-blot módszerrel vizsgáltuk az STE MAPK jelátviteli útvonalra gyakorolt ​​hatását. A RAW 264.7 sejtek LPS-stimulálása szignifikánsan indukálta az ERK, JNK és p38 MAPK foszforilációját, de az STE előkezelés dózisfüggően gátolta ezeket a foszforilációkat (3(a) ábra). Különösen olyan alacsony koncentrációban, mint 10 μg/mL STE szignifikánsan gátolta a p38 MAPK aktivációt.

< 0,01). (c) Az NF- lokalizációjaκA B p65-öt fluoreszcens mikroszkóppal tettük láthatóvá immunfluoreszcens NF-festés után.κB p65 antitest (zöld) és DAPI a sejtmagok megjelenítéséhez (kék).

Ezután az I kifejezéseit elemeztükκB-α és NF-κB Western blottal annak meghatározására, hogy az STE befolyásolja-e az NF-κB aktiválás. Az LPS erősen indukálta az I foszforilált formáitκB-α és NF-κB RAW 264.7 sejtekben, de előkezelés STE-vel 300-nál μg/ml hatékonyan gátolta ezeket a foszforilációkat (3(b) ábra). Az NF-foszforiláció ótaκA B p65 nukleáris transzlokációjához és a célgének ezt követő transzkripciójához vezet [20], megerősítettük, hogy az STE gátolta az NF- LPS által kiváltott nukleáris transzlokációját.κB p65 immunfluoreszcens festéssel (3(c) ábra).

3.4. Az STE hatása az antioxidáns aktivitásra

Az oxidatív stressz különféle típusú fehérjeoxidációt okozhat, ami gyulladáshoz vezet [21]. A DPPH szabad gyökfogó vizsgálat azt mutatta, hogy az STE dózisfüggő módon erős megkötő aktivitással rendelkezik (4(a) ábra). Ezenkívül az LPS-stimuláció körülbelül háromszorosára növelte a ROS-szintet a RAW 264.7 sejtekben, és ezt a növekedést dózisfüggően gátolta az STE előkezelés, és 300 °C-on. μEz az LPS-indukált növekedés teljesen blokkolva volt (4(b) ábra).

< 0,001). (b) Az STE hatása a ROS generálására. A sejteket LPS-sel stimuláltuk (1 μg/ml) különböző koncentrációjú STE (10, 100, 200 vagy 300) hiányában vagy jelenlétében μg/ml) 24 órán át. Az intracelluláris ROS szinteket a DCF fluoreszcencia intenzitásának mérésével határoztuk meg. A statisztikai szignifikanciákat a vivőanyaggal kezelt kontrollcsoporthoz viszonyítva határoztuk meg (

3.5. Az STE hatása a Nrf2/HO-1 útvonal aktiválására

A citoprotektív és antioxidáns gének indukálása Nrf2 aktiváción keresztül a sejt oxidatív stressz elleni védekezésének fő mechanizmusa [22]. Ezért azt vizsgáltuk, hogy a szabad gyökfogó aktivitás és az STE-kezelés ROS-képződésének gátló hatása összefüggésben van-e az Nrf2 és célgénjének indukciójával. A Nrf2 immunfluoreszcens festése azt mutatta, hogy 300-nál μg/mL STE indukálta a Nrf2 nukleáris transzlokációját (5(a) ábra). Ezt követően megvizsgáltuk, hogy az STE befolyásolja-e a HO-1, az Nrf2 egyik downstream célgénjének expresszióját. Az STE dózisfüggően növelte a HO-1 fehérje expresszióját, és a csúcs expressziót 300 percig figyelték meg. μg/ml STE (5(b) ábra). NO vizsgálatot végeztünk a RAW 264.7 sejtek SnPP-vel (50 μM egy HO inhibitor) 30 percig, mielőtt STE-vel kezelnénk őket (300 μg/ml), majd az LPS-t, és az eredmények azt mutatták, hogy az SnPP által blokkolt STE gátolja az LPS-indukált NO-termelést (5(c) ábra). Ezek a megfigyelések arra utalnak, hogy az STE megfigyelt gyulladáscsökkentő hatása a Nrf2/HO-1 tengely aktiválásával függött össze.

< 0,01). (c) Az STE NO gátló hatásának blokkolása az SnPP által az LPS által kiváltott NO termelésre. A RAW 264.7 sejteket STE-vel előkezeltük (300 μg/ml) 1 órán át SnPP jelenlétében vagy hiányában (50 μM, 30 perc), majd LPS-sel stimuláltuk (1 μg/ml) 18 órán át. (

3.6. Az STE HPLC analízise

Az STE amentoflavontartalmát HPLC minőségellenőrző markerként használtuk. Az STE HPLC analíziséből származó adatokat kromatogramok formájában rögzítettük. A 6. ábra az STE és az amentoflavon HPLC kromatogramjait mutatja 340 nm-es detektorral meghatározva, és a 24,79 perces retenciós idejű STE-csúcsot amentoflavonként azonosítja. Az STE amentoflavon tartalmát a standard kalibrációs görbéjéből számítottuk ki, és 37,3 mg/g volt.

4. Megbeszélés

Az akut gyulladás bakteriális vagy vírusfertőzés tünete, míg a krónikus gyulladás lassan, nyilvánvaló tünetek nélkül halad előre, és olyan betegségeket okozhat, mint a magas vérnyomás, cukorbetegség és rák [23]. A krónikus gyulladásnak számos életstílushoz kapcsolódó oka van, beleértve az étkezési szokásokat, a stresszt és a környezetszennyezést [24]. A koreai orvoslás szerint Selaginella Herba (a szárított légi része Selaginella tamariscina Tavasz) tisztítja a vért, elállítja a vérzést, oldja a váladékot, enyhíti az asztma tüneteit, elősegíti a vizeletürítést, kelések kezelésére használható [8]. Továbbá a hatásai Selaginella Herba Úgy gondolják, hogy a felhasznált formától függenek, azaz a nyers gyógynövényt a vér tisztítására, az asztmás tünetek enyhítésére és az amenorrhoea kezelésére használják, míg a pörkölt formát a vérzés megállítására és a végbél prolapsus kezelésére használják [8]. A hagyományos koreai orvoslásban gyakran írták fel gyógyírként különféle betegségekre 3–9 g-os dózisban [8]. Mivel a hagyományos koreai orvoslás egyidejűleg több gyógynövényt is tartalmaz a receptekben, az egyes gyógynövényforrások hatékonyságának és mechanizmusának tanulmányozása szükséges, és ez nagy szerepet játszik az új receptek kidolgozásában. Bár számos fontos bioaktív komponens gyulladáscsökkentő hatása van jelen a Selaginella tamariscina tudományos bizonyítékokról számoltak be a teljes kivonat hatékonyságára és hatásmechanizmusára vonatkozóan Selaginella tamariscina hiányzik, ezért ezt a vizsgálatot az STE gyulladáscsökkentő hatásainak vizsgálatára végeztük el LPS-stimulált RAW 264.7 sejtmodell segítségével, és meghatároztuk az érintett mechanizmus természetét, egy alapvizsgálat részeként új gyógynövény-receptek, ill. új természetes termékek.

Az LPS-t általában gyulladás modellezésére használják, és TLR4 által közvetített jelátvitelen keresztül makrofág-aktivációt indukál, ami gyulladásos mediátorok (pl. NO és PGE) termelődését és kiválasztását eredményezi.2) és proinflammatorikus citokinek (például IL-1βIL-6 és TNF-α) a MAPK és az NF- aktiválásávalκB intracelluláris jelátviteli útvonalak [25]. Az NO endogén módon szintetizálódik, amikor az L-arginin L-citrullinná alakul a nitrogén-monoxid-szintáz (NOS) három izoformájának egyike által [26]. Az iNOS által a makrofágokban túlzott mennyiségű NO citotoxikus, szervi sérülést és gyulladást okoz, az iNOS-gátlókról pedig kimutatták, hogy gyulladásgátló tulajdonságokkal rendelkeznek [27]. PGE2 A gyulladásos ingerek, hormonok vagy növekedési faktorok által kiváltott COX-2 hatására arachidonsavból keletkezik, és kulcsszerepet játszik a gyulladásos válaszadásban [28]. Így a COX-2 az NSAID-ok célpontja. Jelen vizsgálatban azt találták, hogy az STE dózisfüggően gátolja a NO és a PGE termelődését2 LPS-stimulált RAW 264.7 sejtekben, valamint az iNOS és a COX-2 expressziójának elnyomására (1. ábra). Ezenkívül az STE szignifikánsan gátolta az LPS által kiváltott IL-1 szekréciótβ és IL-6 (2. ábra). Eredményeinkkel összhangban Kuo et al. jelentette, hogy a nyers kivonat Selaginella tamariscina csökkenti a proinflammatorikus citokinek, az IL-1 termelődésétβ és tumor nekrózis faktor-α, a humán mezangiális sejtekben, amelyek fontos szerepet játszanak a vesék gyulladásos reakcióiban [29].

A MAPK és az NF-κA B intracelluláris jelátviteli útvonalak kulcsszerepet játszanak a gyulladásos mediátorok makrofágokban történő előállításában [30]. Jelen tanulmányban az STE-vel végzett előkezelés szignifikánsan és dózisfüggően csökkentette az ERK1/2, p38 és JNK foszforilációját, ami arra utalt, hogy az STE gátolta a MAPK jelátvitel aktiválását (3(a) ábra). Az NF aktiválásaκA B útvonal az I foszforilációjához és ubiquitin-függő lebomlásához vezetκBα (egy NF-κB inhibitor) és elősegíti az NF- nukleáris transzlokációjátκB p65, amely proinflammatorikus citokinek, kemokinek és egyéb gyulladásközvetítők termelődését eredményezi [31]. Jelen tanulmányban az STE-vel végzett előkezelés csökkentette az NF-nukleáris transzlokációt.κB p65 az I. foszforilációjának gátlásávalκBα és NF-κB p65 (3(b) és 3(c) ábra). Az STE csak 300-nál blokkolja az NF-kB útvonalat μg/ml, míg a proinflammatorikus citokinek, például az IL-1β és az IL-6 szignifikánsan gátolt olyan alacsony koncentrációban, mint 10 μg/ml. Ez a hatás annak tulajdonítható, hogy az STE érzékenyebb a p38 MAPK foszforilációjának gátlására az aktivált MAPK-k között LPS stimulációval. Woo et al. beszámolt arról, hogy az amentoflavon gátolja az LPS-indukált NO-termelést az NF-gátlásávalκB aktiváció RAW 264.7 sejtekben [15]. Érdekes módon ez a cikk arról számolt be, hogy az amentoflavon előkezelés nem befolyásolta az ERK vagy a JNK LPS által kiváltott foszforilációját. Szumaflavon, amely szintén jelen van a Selaginella tamariscina, arról számoltak be, hogy gátolja az iNOS által közvetített NO-termelést LPS-kezelt makrofágokban, de ez a szuppresszió az AP-1 aktiváció blokkolásával függ össze, nem pedig az NF-κB aktiválás [13]. Ezért úgy tűnik, hogy az STE több célpontra is hatott, hogy gátolja a gyulladásos válaszokat az LPS-stimulált RAW 264.7 sejtekben, mivel számos komponenst tartalmaz.

Endogén szabad gyököket az immunsejtek aktiválása, gyulladás, ischaemia, fertőzés, rák és öregedés generál [32]. Mivel a szabad gyökök nagyon instabil molekulák, amelyek gyorsan reagálhatnak különféle szerves szubsztrátokkal, ezért túlzott felhalmozódásuk in vivo oxidatív stresszt okoz [33]. Az emberi szervezet endogén vagy exogén antioxidánsokkal képes ellensúlyozni az oxidatív stresszt [34]. Az antioxidánsok „szabadgyökfogókként” működnek, megelőzik és elősegítik a ROS okozta károsodások helyreállítását, ezáltal erősítik az immunvédelmet és csökkentik a krónikus betegségek kockázatát [32]. A jelen tanulmány azt mutatja, hogy az STE kiváló DPPH szabadgyök-fogó aktivitással rendelkezik, és dózisfüggően gátolja az LPS által kiváltott ROS növekedést a RAW 264.7 sejtekben (4(a) és 4(b) ábra).

Az Nrf2 egy transzkripciós faktor, és felelős a sejtek redox egyensúlyának szabályozásáért, valamint a védő antioxidáns és fázis II méregtelenítési válaszokért emlősökben [35]. Normál körülmények között az Nrf2 csendes formaként szekvesztrálódik a citoplazmában, a Keap1-hez, annak represszor fehérjéhez kötve [36]. Stresszes körülmények között azonban az Nrf2 disszociál a Keap1-ről, és a sejtmagba transzlokálódik, ahol a detoxifikáló gének (citoprotektív Nrf2 által szabályozott gének, köztük a HO-1, GST, valamint a HO-1, GST, és NQO-1) [37]. A közelmúltban felmerült, hogy a Nrf2/HO-1 tengely farmakológiai manipulációja fontos következményekkel járhat a gyulladás enyhítésében [38], ezért úgy gondoltuk, hogy az STE gyulladáscsökkentő hatásai összefüggésbe hozhatók a Nrf2/HO-val. -1 útvonal. Azt találtuk, hogy az STE-kezelés szignifikánsan és dózisfüggően indukálta a HO-1 expresszióját (5(b) ábra), és a HO-1 indukció SnPP-vel történő blokkolása elnyomta az STE gátló hatását az LPS-indukált NO-termelésre RAW 264.7 sejtekben (5. ábra). (c)). Ezek a megfigyelések arra utalnak, hogy az STE gyulladáscsökkentő hatása legalább részben a Nrf2/HO-1 tengely aktiválásával függ össze, és jelentőségteljes, mert még nem készült tanulmány a HO-1 indukciójáról Selaginella tamariscina vagy annak alkotórészei. Számos tanulmány kimutatta, hogy a növényekből származó vegyületek, például a kurkumin, az izotiocianátok és az antocianinok nemcsak jó antioxidánsok, hanem erős gyulladáscsökkentő szerek is, amelyek Nrf2 indukción keresztül hatnak [39–42]. Ezek a vegyületek elsősorban a Keap1 cisztein-maradékait módosító elektrofilek formájában aktiválják az Nrf2 jelátviteli útvonalat [42]. Ezenkívül más ROS-független útvonalak is szabályozhatják az Nrf2-t, azaz a kináz jelátviteli útvonalak széles skálája, mint például a protein kináz C (PKC), a MAPK-k, a foszfatidil-inozitol 3-kináz (PI3K) és a PKR-szerű endoplazmatikus retikulum kináz (PERK) [43]. Ho et al. azt javasolta, hogy az oxidatív stressz hiányában az Nrf2 aktiválódása szerepet játszhat a ROS-független ER stressz útvonalban az ER-re reagáló gadd34, gadd45, gadd153 és ndr1 gének felszabályozása révén a tetrafluoretilcisztein által kiváltott citotoxicitásban [43]. Így az STE gyulladáscsökkentő hatásokat válthat ki az Nrf2 aktiválásával vagy a ROS-független ER stresszút közvetítésével és a ROS megsemmisítésével az LPS által kiváltott gyulladásos körülmények között.

5. Következtetés

Ez a tanulmány azt mutatja, hogy az STE antioxidáns hatással rendelkezik, és csökkenti az LPS által kiváltott gyulladásos válaszokat a RAW 264.7 sejtekben, és arra utal, hogy az STE ezen hatása az NF-aktiváció gátlásának köszönhető.κB és MAPK, valamint a Nrf2/HO-1 aktiválásának elősegítése.Ezek az eredmények rávilágítanak arra, hogy az STE fitomedicinaként használható a gyulladások megelőzésére vagy gyógyítására, és a jövőben új receptek kidolgozásának alapjaként is felhasználható, szerepet játszva a „bizonyítékokon alapuló orvoslás” fejlődésében a koreai orvoslásban. Ezen eredmények megerősítéséhez állatkísérletekre van szükség az STE toxikológiai és hatékonyságának vizsgálatára különböző gyulladásos betegségekben. A megfelelő humán dózist a jövőben egy részletes, állatkísérletekkel lehet megállapítani.

Adatok elérhetősége

A tanulmány megállapításainak alátámasztására felhasznált adatok kérésre elérhetők a megfelelő szerzőtől.

Összeférhetetlenség

A szerzők kijelentik, hogy jelen cikk közzétételével kapcsolatban nem áll fenn összeférhetetlenség.

A szerzők közreműködései

Dong-Il Kim, mint fő igazgató és a vizsgálat felügyelője volt felelős a tanulmány tervezéséért és finanszírozásáért. Ju-Hee Lee és An-Na Won részt vett a tanulmány tervezésében és a kísérletekben, és megírta a kéziratot. Sun Ah Kim és Jae-Hyun Han kísérleteket végzett, és elvégezte a statisztikai elemzést. Jung Yun Ahn és Chang-Hyun Kim elvégezték a kézirat-revízióhoz szükséges kísérleteket. Minden szerző részt vett a kézirat elkészítésében, és jóváhagyta a végleges változatot.

Köszönetnyilvánítás

Ezt a kutatást a Koreai Egészségügyi Technológiai K+F Projekt támogatása támogatta a Koreai Egészségügyi Iparfejlesztési Intézeten (KHIDI) keresztül, amelyet a Koreai Köztársaság Egészségügyi és Jóléti Minisztériuma finanszírozott (a támogatás száma: HI15C0198).

Hivatkozások

  1. R. Medzhitov, „A gyulladás eredete és élettani szerepei”, Természet, vol. 454. sz. 7203, 428–435, 2008. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  2. S. Danese, E. Dejana és C. Fiocchi: „Immunreguláció mikrovaszkuláris endothelsejtek által: a veleszületett és adaptív immunitás, koaguláció és gyulladás irányítása” The Journal of Immunology, vol. 178. sz. 10, 6017–6022, 2007. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  3. P. Libby, „Gyulladásos mechanizmusok: a gyulladás és a betegség molekuláris alapja”, Táplálkozási Vélemények, vol. 65. sz. 3, pp. S140–S146, 2007. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  4. I. Manabe: „A krónikus gyulladás összekapcsolja a szív- és érrendszeri, az anyagcsere- és a vesebetegségeket” Körforgalmi Lap, vol. 75, sz. 12, pp. 2739–2748, 2011. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  5. S. Becker, S. Mundandhara, R. B. Devlin és M. Madden: „A citokintermelés szabályozása humán alveoláris makrofágokban és légúti epiteliális sejtekben a környezeti levegő szennyezett részecskéire adott válaszként: további mechanikai vizsgálatok” Toxikológia és alkalmazott farmakológia, vol. 207. sz. 2, pp. S269–S275, 2005. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  6. S. Harirforoosh, W. Asghar és F. Jamali: „A nem-szteroid gyulladásgátló gyógyszerek káros hatásai: a gyomor-bélrendszeri, szív- és érrendszeri és veseszövődmények frissítése”, Journal of Pharmacy & Pharmaceutical Sciences, vol. 16. sz. 5, 821–847. o., 2013. Megtekintés: Google Scholar
  7. A. L. Buchman: „A kortikoszteroid-terápia mellékhatásai”, Journal of Clinical Gastroenterology, vol. 33. sz. 4, 289–294, 2001. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  8. M. K. Shin, Hagyományos klinikai gyógynövénytan, Szöul: Yeong Lim's Publisher, 2000, 489-490.
  9. Y.-J. Jung, E. H. Lee, C. G. Lee és munkatársai, „AKR1B10-inhibitory Selaginella tamariscina A kivonat és az amentoflavon csökkenti az A549 humán tüdőráksejtek növekedését in vitro és in vivo. Journal of Ethnopharmacology, vol. 202., 78–84. o., 2017. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  10. Y. Dai, P. P. But, L. Chu és Y. Chan, „Inhibitory Effects of” American Journal of Chinese Medicine, vol. 33. sz. 06, pp. 957–966, 2005. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  11. X.-K. Zheng, Y.-J. Li, L. Zhang, W.-S. Feng és X. Zhang, „Antihyperglycaemic activity of Selaginella tamariscina (Beauv.) Tavasz” Journal of Ethnopharmacology, vol. 133. sz. 2, pp. 531–537, 2011. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  12. L. M. Ha, D. T. Thao, H. T. Huong, C. V. Minh és N. T. Dat: „Toxicity and anticancer effects of an extrakt Selaginella tamariscina egérmodellre" Természetes termékkutatás (korábban Natural Product Letters), vol. 26. sz. 12, 1130–1134, 2012. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  13. J. W. Yang, Y. R. Pokharel, M.-R. Kim, E.-R. Woo, H. K. Choi és K. W. Kang: „Az indukálható nitrogén-monoxid-szintáz gátlása a Selaginella tamariscinából izolált sumaflavonral”, Journal of Ethnopharmacology, vol. 105, sz. 1-2, pp. 107-113, 2006. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  14. C. Hsin, B. Wu, C. Chuang és társai, "Selaginella tamariscina A kivonat elnyomja a TPA által kiváltott inváziót és metasztázist az MMP-9 gátlásával humán orrgarat karcinóma HONE-1 sejtekben. BMC komplementer és alternatív gyógyászat, vol. 13. sz. 1, 2013. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  15. E. Woo, J. Lee, I. Cho, S. Kim és K. Kang: „Az amentoflavon gátolja a nitrogén-monoxid-szintáz indukcióját azáltal, hogy gátolja az NF-κB aktiváció a makrofágokban” Farmakológiai kutatás, vol. 51. sz. 6, pp. 539–546, 2005. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  16. L. D. Dat, B. T. Zhao, N. D. Hung, J. H. Lee, B. S. Min és M. H. Woo, „Lignan derivatives from Selaginella tamariscina és nitrogén-monoxid-gátló hatásuk az LPS-stimulált RAW 264.7 sejtekben. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, vol. 27. sz. 3, 524–529, 2017. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  17. M. I. N. Moreno, M. I. Isla, A. R. Sampietro és M. A. Vattuone: „Argentína több régiójából származó propolisz szabad gyökfogó tevékenységének összehasonlítása” Journal of Ethnopharmacology, vol. 71. sz. 1-2, pp. 109–114, 2000. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  18. W. O. Carter, P. K. Narayanan és J. P. Robinson: „Intracelluláris hidrogén-peroxid és szuperoxid anion detektálása endoteliális sejtekben” Journal of Leukocyte Biology, vol. 55, sz. 2, 153–258, 1994. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  19. P. Zhang, M. Martin, S. M. Michalek és J. Katz: „Role of mitogen-activated protein kinases and NF-κB a gyulladásgátló és gyulladásgátló citokinek szabályozásában a Porphyromonas gingivalis hemagglutinin B által” Fertőzés és immunitás, vol. 73. sz. 7, pp. 3990–3998, 2005. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  20. A. Oeckinghaus és S. Ghosh: „Az NF-kappaB transzkripciós faktorok családja és szabályozása”, Cold Spring Harbor perspektívák a biológiában, vol. 1, sz. 4. o. a000034, 2009. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  21. S. Salzano, P. Checconi, E.-M. Hanschmann és munkatársai: „A gyulladás és az oxidatív stressz kapcsolata a glutationilezett peroxiredoxin-2 felszabadulásával, amely veszélyjelzésként működik” Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, vol. 111. sz. 33, pp. 12157–12162, 2014. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  22. X. L. Chen és C. Kunsch: „Citoprotektív gének indukciója Nrf2/antioxidáns válaszelem útvonalon keresztül: új terápiás megközelítés a gyulladásos betegségek kezelésére”, Jelenlegi gyógyszerészeti tervezés, vol. 10, sz. 8, 879–891, 2004. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  23. J. T. Wu és L. L. Wu, „Akut és krónikus gyulladás: A kockázati tényező(k) hatása az oxidatív és nitrozatív stresszre adott korai gyulladásos válasz előrehaladására”, Journal of Medicinal and Laboratory Sciences, vol. 19, sz. 3, 71–75. o., 2007. Megtekintés: Google Scholar
  24. B. Ruiz-Núñez, L. Pruimboom, D. A. J. Dijck-Brouwer és F. A. J. Muskiet: „Életmód és táplálkozási egyensúlyhiány a nyugati betegségekhez: a krónikus szisztémás, alacsony fokú gyulladás okai és következményei evolúciós kontextusban” The Journal of Nutritional Biochemistry, vol. 24. sz. 7, 1183–1201, 2013. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  25. M. Fujihara, M. Muroi, K.-I. Tanamoto, T. Suzuki, H. Azuma és H. Ikeda: „A makrofágok aktiválásának és dezaktiválásának molekuláris mechanizmusai lipopoliszachariddal: a receptorkomplex szerepei” Farmakológia és terápia, vol. 100, nem. 2, 171–194, 2003. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  26. F. Aktan, „iNOS-mediált nitrogén-monoxid termelés és szabályozása”, Élettudományok, vol. 75, sz. 6, 639–653, 2004. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  27. B. Tiperciuc, A. Pârvu, R. Tamaian, C. Nastas ǎ, I. Ionuţ és O. Oniga: „Új gyulladásgátló tiazolil-karbonil-tioszemikarbazidok és tiazolil-azolok antioxidáns tulajdonságokkal, mint potenciális iNOS inhibitorok”, Gyógyszerkutatás archívuma, vol. 36. sz. 6, 702–714. o., 2013. Megtekintés: Kiadói webhely | ǎ &author=I. Ionuţ&author=&author=O. Oniga&publication_year=2013" target="_blank">Google Tudós
  28. E. Ricciotti és G. A. Fitzgerald, „Prosztaglandinok és gyulladás”, Arterioszklerózis, trombózis és érbiológia, vol. 31. sz. 5, 986–1000, 2011. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  29. Y.-C. Kuo, C.-M. Sun, W.-J. Tsai, J.-C. Ó, W.-P. Chen és C.-Y. Lin: „Kínai gyógynövények, mint az emberi mesangiális sejtproliferáció modulátorai: előzetes tanulmányok”, Journal of Laboratory and Clinical Medicine, vol. 132. sz. 1, 76–85., 1998. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  30. M. Aga, J. J. Watters, Z. A. Pfeiffer, G. J. Wiepz, J. A. Sommer és P. J. Bertics: „Evidence for nucleotide receptor modulation of cross talk between MAP kinase and NF-κB jelátviteli útvonalak egér RAW 264.7 makrofágokban" American Journal of Physiology-Cell Physiology, vol. 286. sz. 4, pp. C923–C930, 2004. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  31. T. Liu, L. Zhang, D. Joo és S. C. Sun, „NF-kappaB signaling in gyulladás”, Jelátvitel és célzott terápia, vol. 2, 2017. Megtekintés itt: Google Scholar
  32. L. A. Pham-Huy, H. He és C. Pham-Huy, „Szabad gyökök, antioxidánsok a betegségekben és az egészségben”, International Journal of Medicinal Science, vol. 4, sz. 2, pp. 89–96, 2008. Megtekintés: Google Scholar
  33. M. Valko, D. Leibfritz, J. Moncol, M. T. D. Cronin, M. Mazur és J. Telser: „Szabad gyökök és antioxidánsok normál élettani funkciókban és emberi betegségekben” The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, vol. 39. sz. 1, 44–84, 2007. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  34. I. S. Young és J. V. Woodside, „Antioxidants in health and disease”, Journal of Clinical Pathology, vol. 54. sz. 3, 176–186. o., 2001. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  35. T. W. Kensler, N. Wakabayashi és S. Biswal: „Sejt túlélési reakciók a környezeti stresszekre a Keap1-Nrf2-ARE útvonalon” Farmakológiai és toxikológiai éves szemle, vol. 47, 89–116. o., 2007. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  36. A. Loboda, M. Damulewicz, E. Pyza, A. Jozkowicz és J. Dulak: „A Nrf2/HO-1 rendszer szerepe a fejlődésben, az oxidatív stresszválasz és a betegségek: evolúciósan konzervált mechanizmus” Sejt- és molekuláris élettudományok, vol. 73. sz. 17, 3221–3247, 2016. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  37. L. Baird és A. T. Dinkova-Kostova, „A Keap1-Nrf2 útvonal citoprotektív szerepe” Toxikológiai Archívum, vol. 85, sz. 4, 241–272, 2011. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  38. R. Motterlini és R. Foresti: „A hem oxigenáz-1 mint gyógyszerkutatás célpontja”, Antioxidánsok és redox jelzés, vol. 20, sz. 11, pp. 1810–1826, 2014. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  39. E. Balogun, M. Hoque, P. Gong és munkatársai: „A kurkumin aktiválja a hem oxigenáz-1 gént az Nrf2 és az antioxidánsokra reagáló elem szabályozásán keresztül” Biokémiai folyóirat, vol. 371. sz. 3, 887–895. o., 2003. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  40. P. Rose, K. W. Yen, N. O. Choon és M. Whiteman:β- A fenil-etil- és 8-metil-szulfiniloktil-izotiocianátok, amelyek a vízitorma alkotóelemei, elnyomják az LPS által kiváltott nitrogén-monoxid és prosztaglandin E2 termelődését a RAW 264.7 makrofágokban. Nitrogén-oxid: Biológia és kémia, vol. 12, sz. 4, 237–243, 2005. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  41. A. Aboonabi és I. Singh: „Az antocianinok kemopreventív szerepe az érelmeszesedésben az Nrf2-ARE, mint a redox indikátoraként és modulátoraként történő aktiválásán keresztül” Biomedicina és farmakoterápia, vol. 72., 30–36. o., 2015. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  42. S. M. Ahmed, L. Luo, A. Namani, X. J. Wang és X. Tang, „Nrf2 signaling pathway: Pivotal roles in gyulladás”, Biochimica et Biophysica Acta (BBA) – A betegség molekuláris alapja, vol. 1863. sz. 2, pp. 585–597, 2017. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas
  43. H. K. Ho, C. C. White, C. Fernandez és munkatársai: „Az Nrf2 aktiválása egy oxidatív-stressz-független útvonalat foglal magában a tetrafluor-etil-cisztein által kiváltott citotoxicitásban” Toxikológiai tudományok, vol. 86. sz. 2, pp. 354–364, 2005. Megtekintés: Kiadói webhely | Google ösztöndíjas

Szerzői jog

Copyright © 2018 An-Na Won et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk, amelyet a Creative Commons Attribution License alapján terjesztenek, és amely lehetővé teszi a korlátlan felhasználást, terjesztést és reprodukálást bármilyen médiában, feltéve, hogy az eredeti műre megfelelően hivatkoznak.


9. Záró megjegyzések

A COVID-19 lehetséges mechanizmusának feltárása vesebetegeknél a közelmúltban kezdődött el. Kimutatták, hogy a SARS-CoV-2 több szervet is megcéloz, pl. vese, szív és tüdő, amelyek később több szerv elégtelenségéhez vezetnek. Bejut a sejtekbe, és az ACE2 receptorok közvetítésével számos immun- és gyulladásos utat indukál, ami súlyos proteinuria kialakulásához vezet a podocitákban és a proximális egyenes tubulussejtekben. Ezenkívül az olyan támogató kezelések, mint a táplálék-kiegészítők és vitaminok, védő hatást fejthetnek ki a gyulladásos citokinek, például a TNF, IL-6, NF-㮫, IL-2, IL-7, IL-10, GSCF, IP10, leszabályozásával, MCP1 és MIP1A. Összességében a jelenlegi bizonyítékok azt sugallják, hogy a vesebetegeknél a támogató kezelések, például a táplálék-kiegészítők és a vitaminok terápiás potenciált jelentenek a COVID-19 ellen. Az A-, D-, E-vitamin és számos nyomelem, köztük cink, szelén, réz, magnézium, flavonoid kvercetin és probiotikumok pótlása előnyös lehet a vírusfertőzések, köztük a COVID-19 megelőzésében és kezelésében, és fokozhatja a vírusfertőzés elleni immunitást. . Ezért az alultáplált, cukorbeteg és elhízott betegeknek személyre szabott táplálkozási tanácsra lehet szükségük egészségi állapotuk javítása érdekében a COVID-19 járvány idején. Mivel még nincsenek farmakológiai stratégiák egy olyan vírusos betegség megelőzésére vagy kezelésére, mint a COVID-19, az immunitás táplálkozási stratégiákkal történő fokozása előnyös és alacsony költségű megközelítés lehet, amelyet meg kell vizsgálni. A kiegyensúlyozott és változatos étrend elérése a jelenlegi globális körülmények között, korlátozott mozgásokkal, és ezért az ajánlott kalória- és mikrotápanyag-mennyiség elérése kihívást jelent. A szelektív mikrotápanyagokkal való kiegészítés azonban előnyös lehet különösen a veszélyeztetett populációk, például az idősek számára. A túlélésen és a beteg kimenetelén túl a vesekárosodás károsíthatja az anyagcserét, a kiválasztást, az adagolást és a gyógyszerek várható koncentrációját. Ennek eredményeként a COVID-19-ben szenvedő betegek veseműködésének gyakori és gondos ellenőrzése a vesebetegségek korai diagnosztizálását, az optimális terápiás koncentráció elérését és a betegség jobb kezelését eredményezheti. A kísérleti és klinikai adatok hiánya miatt azonban a szupportív kezelések és táplálék-kiegészítők pontos terápiás jelentősége homályos. Klinikai eseteket alkalmazó jövőbeni vizsgálatokra van szükség ahhoz, hogy megerősítsék a több táplálék-kiegészítő megfigyelt védő hatását.


Nézd meg a videót: Risk of Urinary Tract Malignant Tumors in Patients With Asymptomatic Microscopic Hematuria (Október 2022).