Információ

Mi ez a rózsaszín virágú növény Sanghajban, Kínában márciusban?

Mi ez a rózsaszín virágú növény Sanghajban, Kínában márciusban?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Úgy tűnik, hogy ennek a növénynek húsos kiemelkedései vannak, amelyek a szárából kinőtt virágokra emlékeztetnek (bár nem tudom azonosítani őket).

Tudja valaki ezeknek a növényeknek a kilétét?


Szerintem ez a kínai Redbud (Cercis chinensis), lásd ezt a képet (innen):


A szerinintegráz helyspecifikusságát a attB ɸBT1 integráz szekvencia preferenciája

A szerin integrázok helyspecifikus rekombinációt közvetítenek, és széles körben alkalmazzák a génsebészetben és a szintetikus biológiában. Azonban a kapcsolódási helyek mely régiói határozzák meg a helyspecifikusságot, és hogyan működnek ezek a régiók a rekombinációban, továbbra is megfoghatatlan. Itt megvizsgáltuk a sorozat jellemzőit attB a ɸBT1 integráz, egy reprezentatív szerin integráz által felismert kapcsolódási helyek. Találtak egy 34 bp-os DNS-motívumot, amely minden pozícióra külön bázis-specifikus preferenciát mutat. A különböző pozíciókban lévő mutációk további vizsgálata a attB szekvencia különböző rekombinációs hatékonyságot és kötési affinitásokat mutat. Azon belül négy konzervált régiót találtunk attB motívum, amely egybeesik a rekombinációs vizsgálatok eredményeivel, és a mutációk a attB A rekombinációt akadályozó szekvencia szinte mindegyike csökkent kötési affinitást okoz.

S1 ábra. Az ɸBT1 rekombinációs tevékenységei attB konszenzus szekvencia (attB motívum) és pszeudo attB webhelyek Arabidopsis thaliana.

S2 ábra. A CTD összehasonlítása és attB Li integráz és ɸBT1 integráz helyei.

S1 táblázat. A tanulmányban használt plazmidok.

S2 táblázat. Ebben a tanulmányban használt alapozók.

S3 táblázat. A ɸBT1 pszeudo helye attB helyek, amelyek a gének intergénjében helyezkednek el.

S4 táblázat. A ɸBT1 pszeudo helye attB helyek, amelyek a gének belsejében helyezkednek el.

S5 táblázat. ɸBT1 pszeudo szekvenciája attB oldalak.

Kérjük, vegye figyelembe: A kiadó nem vállal felelősséget a szerzők által biztosított támogató információk tartalmáért vagy működéséért. Bármilyen lekérdezést (a hiányzó tartalom kivételével) a cikk megfelelő szerzőjéhez kell irányítani.


Jiangsu ivóvíztisztító üzem gépei palackozott víz ára

Jiangsu ivóvíztisztító üzem gépei palackozott víz ára
Leírás
Az RO vízszűrő rendszer képes kezelni a csapvizet és a vesszőkútvizet és a vesszős sós vizet és a tengervizet és időszakot Ez a vízszűrő használható ivóvízhez és vesszős palackozott vízhez és ipari és időszakos vízszűrőhöz a fordított ozmózis fejlett készségeinek használatával a víz tisztítására és időszakra Ennek a vízszűrőnek az RO membránja az USA Hydranautics&comma ez a legjobb RO membrán márka és periodWell Underground Bore Brackish Salty RO vízszűrő

Vízkezelő rendszer üzem
Szilika homok szűrő és vastagbél
Eltávolítja a lebegő szilárd anyagokat és a glutén részecskéket a vízben, és csökkenti a víz zavarosságát.
Aaktív szénszűrő
Eltávolítja a pigmentet és a vesszőt, valamint számos biológiai élőlényt a vízben
Nátrium-ioncserélő és vastagbél
Eltávolítja a kalcium- és magnéziumionokat a vízben és a vesszőben, így lágyítja a vizet
Precíziós szűrő és kettőspont
Biztosítani tudja, hogy a fordított ozmózis membránba kerülő víz szemcsézettsége kisebb legyen, mint 0 és 1 um és periódus
Fordított ozmózis és vastagbél
A fordított ozmózis eszköz a víz tisztítására szolgáló berendezés a félig áteresztő membrán nyomáskülönbségével és periódussal. Fordított ozmotikusnak nevezik, mivel ellentétes a természetes behatolási iránnyal és periódussal A különböző anyagok ozmotikus nyomása és időtartama eltérő
A fordított ozmózis több mint 97%-át képes eltávolítani a kolloid és commamikroorganizmus&vesszőrészecskék és szerves anyagokból, és ezzel a legjobb első választási berendezéssé válik a modern tisztított víz és a nagyon tiszta víz és az űrvíz tervezésében &lnagyon tisztított víz&rpar&periódusA legkiemelkedőbb jellemzők az alacsony energiafelhasználás és a commahio alacsony energiafogyasztás üzemeltetés és karbantartás&időszak
UV Sterillze
Az UV-sugárzás segítségével megöl néhány olyan baktériumot, amelyek átjuthatnak a fordított ozmózis rendszeren is
Ózonos sterilizáló és vastagbél
Előfordulhat, hogy egyes baktériumokat az UV nem öl meg, a commathe sterilizáló pedig az ózont pereli meg, hogy elpusztítsa ezeket a baktériumokat.
Üreges szálas ultraszűrő Ez az ultraszűrő diszszimmetrikus féligáteresztő fóliát alkalmaz, amely makromolekula anyagból készül speciális eljárással és periódusA nyers folyadék nyomás alatt áramlik & a fólia belső oldalán vagy a fóliaoldalon és periódusA makromolekula anyaga és a nyers folyadékban lévő kolloid részecskék eltömődnek a film felületén, és a keringés hatására eltávolítják őket. nyers folyadék&periódusEzután a nyers folyadék feldühödik&vesszővel, továbbá&vesszővel a folyadékban lévő anyag elválik&vesszővel koncentrált&pont
Az ügyfél és az aposs vízforrás-elemzési jelentése és a szükséges végső vízstandard szerint a commawe azt javasolja az ügyfélnek, hogy válassza ki a megfelelő víztisztító telepet és időszakot
Bevezetés
RO vízkezelés&vessző a nyersvíz csapvíz & vessző először előkezeléssel&vesszővel, majd RO kezeléssel&periódussal. Ezeken a kezeléseken keresztül&vessző eltávolítja az oldódó sót 99% és a káros anyagokat&vesszőt, mint például a részecske&vesszőkolloid&vessző szerves szennyeződéseket&vessző nehézfém ionokat&vessző baktériumok&comma vírusokat és hőforrást stb. 96-98&percnt&comma kilépő vízvezetőképesség &le 10&mu S&solcm² &period

A fordított ozmózisos tiszta vízkezelő géprendszer folyamata és vastagbél
Nyersvíz és plusz nyersvíz tartály & plusz nyersvíz szivattyú és plusz homokszűrő + plusz szénszűrő + plusz vízlágyító &lpar opcionális&rpar & plus biztonsági szűrő & plusz nagynyomású szivattyú&plusz fordított ozmózis&plusz tiszta víz tartály + plusz UV sterilizátor &lparozone generálás&rpar&plus precíziós szűrő és plusz vízellátási pontok

Részletes leírásVíztisztító rendszer üzem
1&rpar Amerikából importált RO membránt és vesszőt fogad el, amely 99 és periódus 7 százalék szervetlen sót és vessző nehézfém-iont képes eltávolítani, és teljesen megszabadulni a kolloid és a vessző mikrobiológiai szerves anyagoktól, a vesszőcsírától és a vessző protozoonoktól, a vesszőkórokozóktól, a vessző baktériumoktól és a vessző szervetlen vegyi anyagoktól és így tovább.
2&rpar Nem kell hozzáadni semmilyen vegyszert & vessző stabil tiszta víz minősége & vessző és nincs szennyeződés elvezetett & vessző alacsony előállítási költség és időszak
3&rpar Előkezelő rendszerrel és vesszővel, például aktív szén abszorpciós szűrővel és PP üledékszűrővel felszerelt
4&rpar 304 rozsdamentes acél állvány és csőtartozékok csatlakozása és időszaka
5&rpar Felszerelve


Az ivaros szaporodás szerepe egy invazív klonális növény elterjedésében Solidago canadensis intersimple szekvenciaismétlési markerek segítségével derült ki

Az invazív fajok, amelyek a biológiai sokféleség csökkenését okozó élőhelyek elvesztése után a második helyen állnak, komoly veszélyt jelentenek a natív biológiai sokféleségre és az ökoszisztémákra. Keveset tudunk azokról a mechanizmusokról, amelyek segítségével egyes egzotikus növények invazívvá válnak nem őshonos elterjedési területén. Solidago canadensisÉszak-Amerikában őshonos növényt szándékosan sok olyan országba vitték be, ahol invazív növényré vált. Annak megértése, hogy a szaporodási mód milyen szerepet játszik az egzotikus növények sikeres inváziójában, valamint az ivaros szaporodás és a klonális növekedés viszonylagos jelentőségét, két növény genetikai sokféleségét és klonális szerkezetét. S. canadensis Sanghajból (Kína) származó populációkat vizsgáltak egyszerű szekvenciaismétlések segítségével. A mintákat rácsmintázatban gyűjtöttük 2 m-es intervallumokkal a vizsgált területen belüli szomszédos egyedek között (körülbelül 30 m × 30 m) minden populáció esetében. Az eredmények azt mutatták, hogy a polimorf lókuszok százalékos aránya a két populációban 97,9% és 96,5% volt, és a Simpson Diversity Index segítségével mért klonális diverzitás mindkét populáció esetében 1,00 volt. A vizsgált minták között nem találtunk azonos genotípust. Ebből a tanulmányból azt sugallják, hogy az ivaros szaporodás elősegíti az újak létrejöttét S. canadensis populációkat, míg a klonális terjeszkedés fenntartja és megnöveli a kialakult populációkat. Így korlátozza a szexuális szaporodást S. canadensis hatékonyan ellenőrizheti e faj invázióját.


A hordozott és invazív jellemzők Neisseria meningitidis izolátumok Sanghajban, Kínában 1950 és 2016 között: a B szerocsoportú vakcina bevezetésének következményei

Háttér A B szerocsoportba tartozó invazív meningococcus-betegség (IMD) terjedése növekszik Kínában, azonban keveset tudunk ezekről a meningococcusokról. Ez a tanulmány az IMD-vel és a sanghaji szállítással kapcsolatos izolátumok gyűjteményét jellemzi, és felméri a jelenlegi vakcina-stratégiákat.

Mód Az 1950 és 2016 közötti sanghaji IMD epidemiológiai adatokat az Országos Bejelentendő Betegségek Nyilvántartási Rendszerből szerezték be, és 460 izolátumot gyűjtöttek össze elemzés céljából, köztük 169-et az IMD-ből és 291-et a szállításból. A B szerocsoportú meningococcus (MenB) vakcina lefedettségét a Bexsero® Antigen Sequence Type (BAST) segítségével értékelték.

Eredmények Sanghajban 1950 óta hét IMD-járványt figyeltek meg, az incidencia februártól áprilisig tetőzött. Az elemzéseket a meningococcus poliszacharid vakcina (MPV) bevezetésének időszaka szerint osztották fel: (i) pre-MPV-A, 1965-1980 (ii) post-MPV-A, 1981-2008 és (iii) poszt-MPV-A+ C, 2009-2016. Az IMD előfordulása 55,4/100 000-ről 0,71-re, majd 0,02-re csökkent, és az A szerocsoportú ST-5 komplexről (MenA:cc5) a MenC:cc4821, majd a MenB:cc4821 felé való eltolódásnak felel meg. A MenB IMD az MPV-A+C utáni időszakban vált uralkodóvá (63,2%), melynek 50%-át a cc4821 okozta, a legmagasabb előfordulási gyakorisággal csecsemőknél (0,45/100 000) és 9,5%-os halálozási rátával. Az IMD pozitívan korrelált a szállítási sebességgel. Az adatok azt mutatják, hogy az MPV-A+C utáni időszakban a MenB izolátumok kevesebb mint 25%-át fedezheti a Bexsero®, Trumenba® vakcina vagy egy PorA-alapú NonaMen vakcina.

Következtetések Kínában egyedülálló IMD-epidemiológiát találtak, amely időszakonként hiperepidemiásról alacsony szintű endémiás betegségre változik. A MenB IMD jelenleg dominál Sanghajban, és az izolátumok változatos antigénváltozatokat tartalmaznak, amelyek potenciálisan túlmutatnak az engedélyezett OMV- és fehérjealapú MenB-oltásokkal.

Összegzés Leírják a kínai sanghaji meningococcus-betegséget, és értékelték a jelenlegi vakcinázási megközelítéseket. 1950 óta a MenA:cc5 átváltott a MenC:cc4821-re, majd a MenB:cc4821-re, és 2009 óta a MenB dominál. Különleges antigéneket találtak, amelyek potenciálisan túlmutattak az engedélyezett OMV- és fehérjealapú MenB-oltásokkal.


Eredmények

A hipomorfok azonosítása Atscc2 allél

A meiózist szabályozó genetikai mechanizmusok jobb megértése érdekében szűrtünk egy EMS-mutagenizált populációt, és azonosítottunk egy steril növényt (sor88). Visszakeresztezés után sor88 vad típusú (WT) Col-0-val három generáción keresztül, a stabil sor88 a növényeknek enyhe vegetatív növekedési hibájuk van négy és nyolc hetes stádiumban a WT-hez képest (S1A és S1B ábra). Azonban, sor88 a növények szinte teljesen sterilek és nagyon kevés magot termelnek (0,7 ± 0,8 mag per szilikon, n = 21, p-érték = 4,9E-48, kétfarkú Student's t teszt) összehasonlítva a WT-vel (55,5 ± 2,5 mag szilikonként, n = 21) (S1C és S1D ​​ábra). A WT porzók kövérek, érett stigmáikat virágpor borítja (S1E ábra), míg sor88 a növények stigmáikon hiányzik a pollen, ami a hím ivarsejtek termelésének hibájára utal (S1F ábra). Az Alexander-festés a pollen életképességére szignifikáns csökkenést mutatott a portokonkénti életképes pollenszemek számában sor88 (átlag = 20,3 ± 12,4, n = 19, p-érték = 2,1E-31, kétfarkú diák t teszt), összehasonlítva a WT-vel (átlag = 581,1 ± 58,3, n = 19) (S1H és S1G ábra). Ezekkel a megfigyelésekkel összhangban a tetrad stádiumú mikrospórák toluidinkék festése azt mutatta, hogy a hím meiózisok 56,1%-a (n = 57) sor88 A növények változó méretű mikrospórákat tartalmazó poliádokat eredményeznek (S1J ábra), míg a WT növények csak négy hasonló méretű mikrospórát tartalmazó tetradokat (S1I ábra, n = 48). Ezek a fenotípusok a meiotikus kromoszóma szegregáció hibájára utalnak sor88.

Heterozigóta F1 növények (sor88 mint a női szülő és a WT Lansberg erecta (Ler), mint a férfi szülő) normális termékenységgel rendelkeznek, ami azt jelzi, hogy a mutáció recesszív. Hagytuk, hogy az F1 növények önmegtermékenyüljenek, és 97 steril F2 növény tömeges szegregáns analízisét alkalmaztuk, hogy a mutáns lókuszt az 5. kromoszóma felkarján lévő régióra térképezzük (S2A és S2B ábra). A régió négy jelölt gént tartalmaz, köztük AT5G15540 (AtSCC2), amely a WT referenciaszekvenciához képest mutációt tartalmaz. Az egynukleotidos polimorfizmus egy G-ből A-ba való átmenet a C-terminálisban AtSCC2 (5 049 797 bp), amely nem eredményez aminosav változást, de várhatóan megszakítja a splicing helyet a 22. exon 3' végén (S2C ábra). Az allélok genotipizálása az F2 utódokban azt mutatja, hogy a homozigóta WT (n = 409) és a heterozigóták (n = 816) aránya megfelel az 1:2 aránynak (p(χ 2 ) = 0,99, khi-négyzet teszt), míg a mutáns (n ​​= 278) és a WT fenotípusok (n = 1225) aránya jelentősen eltér az 1:3 aránytól (S1 táblázat) (χ 2 = 33,6 > χ 2 0.05 = 3,8, khi-négyzet próba). Ezek a szegregációs arányok összhangban vannak egyetlen recesszív alléllel, amelynek embrionális halálos fenotípusa nem teljesen penetráns.

Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a teljes funkcióvesztés AtSCC2 embrionális letalitáshoz vezet [36]. Annak megerősítésére, hogy a sor88 A fenotípust az általunk leképezett mutáció okozza AtSCC2, átmentünk sor88 három T-DNS allél heterozigótáival AtSCC2 (Atscc2-1, Atscc2-3 és Atscc2-4) (1A. és 1B. ábra). Ez a három T-DNS allél homozigótaként embrionálisan halálos, amint azt a homozigóta WT növények és heterozigóták 1:2 szegregációs aránya mutatja az F2 utódokban. Atscc2-1 +/- (67/110, p(χ 2 ) = 0,23, khi-négyzet teszt), Atscc2-3 +/- (33/63, p(χ 2 ) = 0,91, khi-négyzet teszt) és Atscc2-4 +/- (33/58, p(χ 2 ) = 0,63, khi-négyzet teszt) növények (S1 táblázat), valamint a homozigóta mutáns F2 teljes hiánya (S1 táblázat). Következetesen két független allél összetett heterozigóta F1 növények aránya (sor88 - /Atscc2-1 - és sor88 - /Atscc2-3 - ) megfelelőjükkel Atscc2-5 +/- heterozigóta F1 növények 1:1 (χ 2 ≤ χ0.05 2 = 3,84, khi-négyzet próba) (S2 táblázat). A heterozigóta F1 vegyület aránya sor88 - /Atscc2-4 - val vel Atscc2-5 +/- a heterozigóta F1 növények nem felelnek meg az 1:1 aránynak (χ 2 = 4,02 > χ0.05 2 = 3,84), valószínűleg az alacsony populációszám vagy egy nem teljesen penetráns embrionális letális fenotípus miatt. Az összes heterozigóta F1 utódnak súlyos vegetatív növekedési rendellenességei voltak a homozigótákhoz képest sor88 növények és a WT (1B. ábra), alátámasztva az alapvető szerepét AtSCC2 mitózisban. Ezeknek az összetett heterozigóta növényeknek szintén rövid szilikonjai vannak, és nincs pollen a stigmáikon (1C és 1F–1H ábra), a WT-hez képest (1C és 1D ábra), hasonlóan sor88 (1C. és 1E. ábra). Az összetett heterozigóta növények pollen életképessége csökken (1J–1M ábra), a WT-hez képest (1I. ábra). Az összetett heterozigóták abnormális tetrad állapotú mikrospórákkal is rendelkeznek egyenetlen méretű poliádokkal (1P–1R ábra), hasonlóan sor88 (1O. ábra) és ellentétben a WT-vel (1N. ábra). Ezek az eredmények azt mutatják sor88 mutáns allélja AtSCC2 amelyet ezentúl úgy fogunk hívni Atscc2-5.

(A) A diagram AtSCC2 gén és AtSCC2 fehérje szerkezete. A mutáns allélek a génszerkezet felett vannak jelölve (fordított háromszögek és átlós nyíl). (B) WT, sor88 és három összetett heterozigóta mutáns sor88 egyénnel Atscc2 allélok. Rúd = 3 cm. (C) A WT elsődleges szárai, sor88 és három összetett heterozigóta növény. Rúd = 3 cm. (D-H) A WT nyílt virágai, sor88 és három összetett heterozigóta növény. Rúd = 0,5 mm. (I-M) a WT Alexander-festése, sor88 és három összetett heterozigóta növényi portok. Rúd = 100 μm. (N-R) A WT tetrad-stádiumú mikrospórák toluidinkék festése, sor88 és három összetett heterozigóta növény. Piros nyilak jelzik a kóros mikronukleuszt a tetrad szakaszban. Rúd = 5 μm.

Transz-komplementációt is alkalmaztunk a WT AtSCC2 kódoló szekvenciával, amely egy FLAG-címkéhez volt fuzionálva, és amelyet a AtACTIN7 promóter megerősíti, hogy a Atscc2-5 fenotípusokat a mutáció okozza a AtSCC2 lókusz. Az AtACT7::AtSCC2-FLAG A transzgén képes megmenteni a termékenységet, a pollen életképességét és a meiotikus hibáit Atscc2-5 -/- növények (S3A–S3G ábra). Az anti-FLAG antitesttel végzett Western-blot megerősítette, hogy az AtSCC2-FLAG fúzió a várt méretben expresszálódik a transzgenikus növényekben (211,6 kD S3E ábra). Ezek az eredmények igazolják a pontmutációt AtSCC2 mint az általunk megfigyelt mutáns fenotípusok okozója Atscc2-5.

Az Atscc2-5 a 22-es exon határán lévő pontmutáció (S2C és S4A ábra) az előrejelzések szerint megzavarja az illesztési helyet. Ennek a hipotézisnek a tesztelésére felerősítettük a AtSCC2 pontmutációt átívelő primerek segítségével, és megállapította, hogy Atscc2-5 két átiratot fejez ki: egy WT AtSCC2 átirat és egy 47 bp-os deléciós verzió (S4B ábra). A kvantitatív valós idejű reverz transzkripciós PCR (qRT-PCR) kimutatta, hogy a teljes hosszúságú AtSCC2 az átírás lényegesen alacsonyabb (

2% meiocitákban) in Atscc2-5 a WT-hez képest (S4C ábra). Ezt a WT és a RNS-seq adatai is alátámasztják Atscc2-5 meiociták (S5A ábra). Azt gyanítjuk, hogy a csökkentett szint teljes hosszúságú AtSCC2 átirat be Atscc2-5 oka lehet egy korai terminációs kodon, amely nonszensz-közvetített mRNS-bomlást (NMD) indukál [38]. Úgy tűnik, hogy az illesztési hely megszakítása egy upstream kriptikus splice hely alkalmazását váltja ki, ami 47 bp-os deléciót eredményez az mRNS-ben, amely idő előtti stopkodont hoz létre, és csonkolt AtSCC2 fehérjét (1-1400 aminosav) eredményezhet. Atscc2-5 (S5B ábra). Azt gyanítjuk, hogy a maradék ép AtSCC2 átiratok be Atscc2-5 elegendőek az embrionális letalitás megmentésére, de továbbra is aberráns meiotikus fenotípusokat okoznak.

Az Atscc2-5 mutáns több meiotikus hibát mutat

A WT és a mutáns pollen anyasejtek (PMC) kromoszóma terjedését 4', 6-diamidino-2-fenil-indollal (DAPI) festettük, hogy megvizsgáljuk a meiotikus hibákat. Atscc2-5 (2A. ábra). A leptotennél a Atscc2-5 A kromoszómák nagyon érdesek és kevésbé kondenzáltnak tűnnek a WT-hez képest, amelyek különálló vékony szálakként jelennek meg. A zigoténben és a pachyténben a WT kromoszómák tovább kondenzálódnak, a homológok egymáshoz igazodnak, és a szinapszis vastag fonalszerű struktúrákat eredményez. Ban ben Atscc2-5 meiociták, a kromoszóma hasonló stádiumában viszonylag vékonyak és hatástalanok maradnak, ami a szinapszis hibájára utal. A diploténnél végzett deszinapszis után a WT homológok a keresztezési helyeken chiasmán keresztül kapcsolódnak, és a diakinézis során öt erősen kondenzált bivalenst alkotnak. Ezzel szemben a kondenzáció a Atscc2-5 A diplotén kromoszómák normálisnak tűnnek, de a diakinézis során összegabalyodott kromoszómák vagy többértékű kromoszómák figyelhetők meg. Az I. metafázisban Atscc2-5 A kromoszómák többértékű tömegben kapcsolódnak egymáshoz, míg a WT meiociták öt bivalenssel rendelkeznek az egyenlítői lemezen. Anafázisban a WT homológok ellentétes pólusokra szegregálódnak, míg a Atscc2-5 A meiociták nem megfelelő kromoszóma-szegregációt és kromoszóma-fragmentációt mutatnak, ami összhangban van a korábbi megfigyelésekkel. AtSCC2-RNAi növények [36]. A WT-ben a testvérkromatidák szegregációja a meiosis II során négy mag kialakulását eredményezi. Atscc2-5Összehasonlításképpen, több mikromagot tartalmazó poliádokat állít elő.

(A) A WT kromoszóma terjedése és Atscc2-5 hím meiociták DAPI-val festve. A sárga nyilak jelzik az aszinaptikus kromoszómákat, egyértékű, rendellenes kromoszómaösszefonódásokat vagy -fragmenseket Atscc2-5. Rúd = 5 μm. (B) Fluoreszcencia in situ hibridizáció (FISH) a WT és Atscc2-5 kromoszómák centromer próbával. A sárga számok a centromerek számát jelzik a meiocitákban. Rúd = 5 μm.

Hogy tovább vizsgáljuk a Atscc2-5 kromoszóma szegregációs hiba esetén fluoreszcenciát alkalmaztunk in situ hibridizáció (FISH) 180 bp centromer ismétlődő próbával. Nem tapasztaltunk nyilvánvaló különbséget a centromer jelek számában a WT és a Atscc2-5 a leptotennél (2B. ábra). Ez az eredmény megerősíti, hogy a duplikált testvérkromatidák a mutáns és a WT meiociták centromer régióiban kapcsolódnak egymáshoz, ami arra utal, hogy a centromer kohezin terhelés kezdetben elegendő. A pachiténnél a WT homológok szinapszisa öt pár centromer jelet hoz létre, míg Atscc2-5 A meiociták több mint öt jellel rendelkeznek, ami a centromerek homológ párosításának hibáját jelzi. Hasonlóképpen, diakinézis esetén a WT-nek öt jelpárja van, míg a legtöbb jel be Atscc2-5 a meiociták páratlanok. Az I. metafázisban és az I. anafázisban a WT centromer jelei ellentétes pólusokra szegregálódnak, míg Atscc2-5 A meiociták több mint 10 centromer jellel rendelkeznek (a 2B. ábrán 16-ot mutatunk be), köztük néhányat, amelyek késésben vannak, ami a korai testvérkromatid szeparációt (PSCS) jelzi [39]. A II metafázisban a WT 10 páros centromer jelet tartalmaz az egyenlítői lemezen, de Atscc2-5 rosszul szervezett, párosított és párosítatlan jelek keveréke, ami szintén összhangban van a PSCS-vel. Ezek az eredmények azt sugallják, hogy a centromer kohézin fenntartása a pachyténben kezdődik, és a meiózis végéig folytatódik.

Elemeztük a három összetett heterozigóta mutáns növény kromoszóma morfológiáját és dinamikáját is, és azt találtuk, hogy meiotikus fenotípusaik hasonlóak a növényekhez. Atscc2-5 egyetlen mutáns (S6 ábra). Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a meiotikus hibák a Atscc2-5 A növények a teljes hosszúságú AtSCC2 csökkenésének köszönhetőek, nem pedig egy csonka fehérje expressziójának.

AtSCC2 szükséges a meiózis-specifikus kohezin betöltéséhez, és genetikailag ugyanazon az úton hat, mint AtSYN1 és AtWAPL1/2

Mivel az SCC2-ről széles körben beszámoltak arról, hogy felelős a kohézin betöltéséért [5], beleértve az in Arabidopsis [36], az AtSYN1 immunfluoreszcens festését alkalmaztuk a meiózis-specifikus kohezin lokalizációjának vizsgálatára. A WT-ben az AtSYN1 jelek a preleptotenben diffúz gócokként jelennek meg, és meghosszabbítják a kromoszómák hosszát a leptotennél (3A. ábra). A diploténtől kezdve az AtWAPL1 és AtWAPL2 leválasztja a kohézineket a kromoszómakarokról [19, 20]. Azonban, ben Atscc2-5, az AtSYN1 jelek alig figyelhetők meg a preleptotennél, és a leptotentől kezdve nem folytonosak (3A. ábra), ami a centromerek és a kromoszómakarok kezdeti kohéziójának lehetséges hibájára utal. Korábban arról számoltak be, hogy az AtSYN1 jeleket jelez Atspo11-1-1 és Atscc3-1 Az egyedi mutáns meiociták hasonlóak a vad típushoz, míg az AtSYN1 jelek megszakadnak Atspo11-1-1 Atscc3-1 kettős mutáns, ami arra utal, hogy az AtSYN1 kromoszómákkal való asszociációjához AtSCC3 és AtSPO11-1 is szükséges [9]. Ellentétben a továbbfejlesztett AtSYN1 hibákkal Atspo11-1-1 Atscc3-1 [9], Atspo11-1-1 Atscc2-5 kettős mutáns hasonló AtSYN1 hibákat mutat a Atscc2-5 zigoténnél (3B. ábra), jelezve, hogy AtSPO11-1 nem játszik szinergikus szerepet AtSCC2 Az AtSYN1 lokalizáció folyamatában, ami összhangban van a korábbi megállapításokkal, miszerint a SYN1/REC8 terhelése SPO11-1 független rizsben [40].

(A) Az AtSYN1 eloszlása ​​az interfázistól a pachiténig a WT-ben és Atscc2-5. Rúd = 5 μm. (B) Az AtSYN1 eloszlása ​​in Atspo11-1-1 és Atspo11-1-1 Atscc2-5 zigotén kromoszómák. Rúd = 5 μm.

Mivel az AtSYN1 egy meiózis-specifikus kohézin alegység, és az AtWAPL1/AtWAPL2 felelős a kohézin eltávolításáért a késői profázisban, különösen a kromoszómakarokon, elemeztük a Atsyn1 Atscc2-5 dupla és Atwapl1-1 Atwapl2 Atscc2-5 hármas mutánsok. A kromoszóma fenotípusai a Atsyn1 Atscc2-5 kettős mutáns (S7D ábra) hasonlóak Atscc2-5 és Atsyn1 egyetlen mutáns minden vizsgált szakaszban (S7B és S7C ábra), beleértve a diffúz kromoszómákat, az aberráns pachytén morfológiát, az összefonódott multivalenseket, a PSCS-t és a kromoszóma fragmentációt (S7A ábra). Mivel az AtWAPL1 és AtWAPL2 funkciója a kohézin eltávolítására, az AtSCC2 pedig a kohézin betöltésében működik, feltételeztük, hogy az AtWAPL1/AtWAPL2 mutációk részben megmenthetik a Atscc2-5 meiotikus hiba. Váratlanul a Atwapl1 Atwapl2 Atscc2-5 A hármas mutáns steril, és atipikus pachytén kromoszómái, kromoszóma-összefonódásai és kromoszóma-fragmentációja van (S7F ábra), hasonlóan a Atscc2-5 egyetlen mutáns (S7B ábra), ami arra utal, hogy AtSCC2, AtWAPL1 és AtWAPL2 episztatikusak egymás számára. Lehetséges, hogy a PSCS ben megfigyelt Atscc2-5 Ennek oka a kromoszómakar kohéziós hibái mellett az elégtelen AtSYN1 által közvetített centromer kohézió.

A DSB-k kialakulása normálisnak tűnik, de a javításuk hatással van Atscc2-5

A kromoszóma fragmentáció megfigyelése a Atscc2-5 azt sugallja AtSCC2 részt vehet a meiotikus DSB javításban. Megvizsgáltuk, hogy az AtSCC2 vagy a kromoszómához kötött kohezin hiánya befolyásolja-e a meiotikus DSB-k képződését, két DSB marker, a γH2AX, egy foszforilált hiszton variáns [41] és az AtDMC1, egy rekombináz [42] immunfluoreszcens festésével WT-ben és Atscc2-5 zigotén meiociták (4A. ábra). Nem tapasztaltunk szignifikáns különbséget (mindkét p-érték > 0,05, két farkú Student-féle t teszt) a WT közötti AtDMC1 vagy γH2AX gócok számában (n = 21 sejt AtDMC1 esetén n = 22 sejt γH2AX esetén) és Atscc2-5 (n = 24 AtDMC1 esetén n = 22 sejt γH2AX esetén 4B. ábra), ami arra utal, hogy AtSCC2 nem szükséges a DSB létrehozásához. Ez összhangban van a korábbi jelentéssel Caenorhabditis elegans [43].

(A) A γH2AX és a DMC1 lokalizációja WT-ben és Atscc2-5 zigotén hím meiociták. Rúd = 5 μm. (B) A γH2AX és DMC1 gócok számának diagramja WT-ben és Atscc2-5 zigotén hím meiociták (kétfarkú Student t teszt). (C) Fluoreszcencia in situ a WT hibridizációja, Atscc2-5, Atspo11-1-1, Atspo11-1-1 Atscc2-5, Atswi1, és Atswi1 Atscc2-5 kettős mutáns kromoszómák centromer próbák segítségével. A sárga nyilak a testvérkromatidák elkülönült centromereit jelzik az I. metafázisban. Bar = 5 μm.

Annak tesztelésére, hogy a DSB javítási hibái SPO11-1-függőek-e, bemutattuk a Atspo11-1-1 mutáció [44] a Atscc2-5 mutáns háttér. AtSPO11-1 szükséges a meiotikus DSB-k generálásához, és a Atspo11-1-1 A mutáns diakinézisében univalensekkel rendelkezik, amelyek véletlenszerűen szegregálódnak az I. metafázisban/anafázisban (4C. ábra). Az Atspo11-1-1 Atscc2-5 A kettős mutánsnak 10 fragmentálatlan univalense van a diakinézisben, és nincs többértékű mutáns az I. metafázisban, ami arra utal, hogy AtSCC2 részt vesz benne AtSPO11-1-függő DSB javítás. Ezenkívül az I. metafázis Atspo11-1-1 Atscc2-5 Az univalensek PSCS-t mutatnak, valószínűleg a hibás AtSYN1 lokalizáció miatt Atscc2-5, amely további bizonyítékot szolgáltat arra vonatkozóan, hogy a testvérkromatidák közötti centromer kohézin sérül. AtSWI1 szükséges a testvérkromatid kohezin létrejöttéhez és a meiotikus rekombináció megindításához [18, 45]. Atswi1 A mutánsok univalensekkel rendelkeznek, amelyek véletlenszerűen szegregálódnak az I. metafázisban, és észrevehető PSCS-t mutatnak. Ban,-ben Atswi1 Atscc2-5 kettős mutánsok, a testvérkromatidák mono-orientáltak, és nincs kromoszóma fragmentáció, ami hasonlít a meiotikus hibákra. Atspo11-1-1 Atscc2-5 kettős mutánsok. Ezek az eredmények további bizonyítékot szolgáltatnak arra, hogy AtSCC2 részt vesz a meiotikus rekombinációban, valószínűleg a kohézin töltésén keresztül.

Kivizsgálni, hogy vajon AtSCC2 szerepe van a meiotikus rekombináció más szakaszaiban, kettős mutánsokat hoztunk létre Atscc2-5 val vel Atatm-2 (DSB válasz), Atdmc1 (szálinvázió), Atrad51-1 (szálinvázió), Atmsh4-1 (CO felbontás), ill Atmus81-2 (CO felbontás) (5. ábra). Összehasonlítva Atscc2-5 és Atatm-2 egyetlen mutáns esetén a kromoszóma fragmentáció súlyosbodik Atatm-2 Atscc2-5 az I. anafázisban (5D. ábra), ami arra utal AtSCC2 szinergikusan hat AtATM a meiotikus rekombináció közvetítésében. Atdmc1 A meiocitákban 10 egyértékű, de nincs kromoszóma fragmentáció vagy összefonódás, feltehetően azért, mert az AtRAD51 képes kijavítani a DSB-ket testvérkromatidák templátként való felhasználásával [42]. Az Atdmc1 Atscc2-5 a kettős mutáns kromoszóma-összefonódásokkal rendelkezik az I. metafázisban és kromoszómafragmensek az anafázis I-ben (5F ábra), hasonlóan a Atscc2-5 egyetlen mutáns (5B. ábra), ami azt jelzi, hogy AtSCC2 és AtDMC1 episztatikusak egymással a meiotikus rekombináció során. Az Atrad51-1 Atscc2-5 a kettős mutáns hasonló súlyos kromoszóma-összefonódási és fragmentációs fenotípusokkal rendelkezik (5H ábra), mint a Atrad51-1 egyetlen mutáns (5G. ábra), ami azt jelzi, hogy AtRAD51 és AtSCC2 episztatikusak egymás számára. Összességében ezek az eredmények alátámasztják azt az elképzelést, hogy az AtSCC2-re van szükség a hatékony DSB-javításhoz, és az AtRAD51-gyel együtt működik, olyan módon, amely különbözik az AtDMC1 meiózis-specifikus rekombináztól. Alternatív megoldásként azért, mert Atscc2-5 még mindig nagyon alacsony szinten fejezi ki a vad típust AtSCC2 Ezek az eredmények arra utalhatnak, hogy az AtRAD51 érzékenyebb az AtSCC2 szintekre, mint az AtDMC1.

A DAPI-festett kromoszóma a pachyténben, a metafázis I-ben és az anafázis I-ben terjed az (A) WT-ben, (B) Atscc2-5, (C) Atatm-2, (D) Atatm-2 Atscc2-5, (E) Atdmc1, (F) Atdmc1 Atscc2-5, (G) Atrad51-1, (H) Atrad51-1 Atscc2-5, (én) Atmsh4-1, (J) Atmsh4-1 Atscc2-5, (K) Atmus81-2, (L) Atmus81-2 Atscc2-5. Rúd = 5 μm.

Arabidopsis A CO-nak két osztálya van: Az I-es típusú CO-k érzékenyek a CO-interferenciának nevezett szabályozási jelenségre, és a ZMM fehérjék osztályához kapcsolódnak, beleértve az AtMSH4-et és a II-es típusú CO-k nem érzékenyek az interferenciára, és AtMUS81-függőek [46, 47]. Kivizsgálni, hogy vajon AtSCC2 részt vesz az egyik vagy a másik, vagy mindkét útban, hasonlítottuk össze Atmsh4-1 Atscc2-5 és Atmus81-2 Atscc2-5 kettős mutánsok a megfelelő egyszeres mutánsokkal. Se Atmsh4-1 sem Atmus81-2 kromoszóma-összefonódás vagy fragmentáció fenotípusú (5I. és 5K. ábra). Ezzel szemben a Atmsh4-1 Atscc2-5 és Atmus81-2 Atscc2-5 A kettős mutánsok kromoszóma-összefonódási és fragmentációs fenotípusai hasonlóak a Atscc2-5 (5J és 5L ábra), ami arra utal AtSCC2 feltehetően működik AtMSH4 és AtMUS81. Összességében ezek az adatok azt sugallják, hogy a meiotikus rekombináció során az AtSCC2-re nincs szükség a DSB képződéshez, de kritikus fontosságú a CO-feloldás előtti lépésekben, oly módon, hogy az AtRAD51-et nagyobb mértékben érinti, mint az AtDMC1.

Az AtSCC2 szükséges az axiális elem és a szinaptonemális komplex (SC) kialakulásához

A fent leírtak szerint, Atscc2-5 A zigotén kromoszómák kevésbé kondenzáltnak tűnnek a WT-hez képest (2A. ábra). Beszámoltak arról, hogy csökkent expressziója AtSCC2 befolyásolja az axiális elemképzést [36]. A tengely/SC morfogenezis koordinálásában fontos szerepet játszó AtASY1 [48] és az SC transzverzális elemek [49] komponense, az AtZYP1 immunfluoreszcens festését alkalmaztuk az axiális elemképződés vizsgálatára Atscc2-5. A pontozott AtASY1 jelek a leptotén kromoszómáihoz kapcsolódnak, majd lineárisnak tűnnek a WT zigotén kromoszómáin (S8A ábra). A pachiténtől a diakinézisig, ahogy a homológ kromoszómák kondenzálódnak, szinapszisok és deszinapszisok alakulnak ki, az AtASY1 jelek fokozatosan csökkennek, és csak az erősen kondenzált heterokromatikus régiókban maradnak kiemelkedőek. Ban ben Atscc2-5 A leptotén meiociták, a pontozott AtASY1 jelek hasonlóak a WT-hez, de kevésbé koncentráltak, ami arra utal, hogy a tengely kezdeti összeállítása nincs súlyosan veszélyeztetve Atscc2-5. A zigoténnél az AtASY1 nem folytonos és lineáris jelek keverékeként jelenik meg, a homológ-illesztés és a szinapszis hiánya miatt, eltávolításuk a pachiténnél késik, ami a tengely összeszerelésének hibájára utal. Atscc2-5. Diakinézis révén az AtASY1 bejelez Atscc2-5 gyengébbek a WT-hez képest. Ezek a megfigyelések azt mutatják, hogy beindulhat a tengelyképződés Atscc2-5, de nem működik hatékonyan és rendellenesen szétszerelhető, ami tovább támogatja a szinapszis hibáját. Az AtASY1 lokalizáció a zigoténben a Atspo11-1 Atscc2-5 a kettős mutáns additív hibákat mutat a Atscc2-5 egyetlen mutáns (S8B ábra), ami arra utal AtSCC2 szinergikus szerepe van AtSPO11-1 az ASY1 meiózis során történő összeállításában, összhangban a kukoricában közölt legújabb eredményekkel [50].

Mivel Atscc2-5 A növények aberráns pachytén kromoszómákkal és AtASY1 összeállítással rendelkeznek, feltételeztük, hogy SC transzverzális elemeik is hibásak lehetnek. A pachytén meiocitákban az AtZYP1 jelek nagymértékben csökkennek Atscc2-5, összehasonlítva a lineáris AtZYP1 eloszlással a WT kromoszómákon (S8C ábra). Összességében eredményeink erős bizonyítékot szolgáltatnak arra, hogy az AtSCC2 szükséges az axiális elemek összeszereléséhez és az SC kialakításához.

Az AtSCC2 kölcsönhatásba lép az AtSCC4-gyel in vivo, de az AtSCC4 nélkülözhetetlen a férfi meiózishoz

Beszámoltak arról, hogy az SCC2 több szervezetben is kölcsönhatásba lép az SCC4-gyel, beleértve az embert, a kukoricát és Arabidopsis [25, 27, 35]. Our yeast two-hybrid assay also confirmed their physical interaction (S9A and S9B Fig). The interaction was further validated by bimolecular fluorescence complementation (BiFC) in tobacco cells (S9C Fig). A recent study demonstrated that the N terminus of AtSCC2 (1–824 aa) interacts with AtSCC4 [27]. To further refine the specific interacting regions, we divided the N-terminus into AtSCC2N1 (1–254 aa) and AtSCC2N2 (255–427 aa) (S9A Fig) and found that only AtSCC2N1 interacts with AtSCC4 (S9B Fig). Mivel AtSCC4 is essential in mitosis [27], we used a tissue-specific RNAi strategy to test its role in meiosis by targeting two AtSCC4 regions expressed from the meiosis-specific AtDMC1 promóter (AtDMC1::AtSCC4 RNAi -M és AtDMC1::AtSCC4 RNAi -N S9D and S9E Fig), and obtained 87 positive transformants, including 37 AtDMC1::AtSCC4 RNAi -M and 50 AtDMC1::AtSCC4 RNAi -N növények. Öt AtDMC1::AtSCC4 RNAi -M plants and ten AtDMC1::AtSCC4 RNAi -N plants had relatively normal vegetative growth, but reduced fertility. We selected 8 sterile lines for subsequent study. The pollen viability and number of seeds in all 8 lines were significantly reduced compared to WT (n = 10, S10A and S10B Fig). qRT-PCR revealed that AtSCC4 expression levels in the meiocytes of the RNAi lines are significantly reduced compared to WT (p-value < 0.01, two-tailed Student’s t test, S10C Fig). We further analyzed two representative RNAi lines (T2-102 és T2-161), which have reduced fertility, short siliques, few seeds and less viable pollen relative to WT (Fig 6A–6O), but their tetrad-stage microspores have no obvious differences compared to WT (Fig 6P–6S). Analysis of male meiotic chromosome spreads confirmed that stages in the RNAi plants were similar to WT (S11 Fig). This result suggests that AtSCC4 does not play a prominent role in male meiosis, but it is formally possible that the residual gene product, after knocking down gene expression by 90%, is sufficient for wild type function. The RNAi plants appeared to produce sufficient pollen to allow pollination, so we hypothesized that female fertility may be impaired in AtSCC4 RNAi növények. To test this hypothesis, we reciprocally crossed the WT and AtSCC4 RNAi növények. WT pistils pollenated with T2-161 vagy T2-102 pollen produced indistinguishable seeds per silique respectively compared with WT (S3 Table and S12A Fig). As female parents the transgenic plants produced only 15.9 and 14.6 normal seeds, respectively (S3 Table and S12A Fig). However, no obvious female meiotic defects were observed in WT (n = 159), T2-102 (n = 86) or T2-161 (n = 54) (S12B Fig). A previous study showed that AtSCC4 is required for embryo development [27]. Consistently, 11.8% (n = 17) T2-161 and 28.6% (n = 14) T2-102 embryos exhibited asymmetric cell division at globular stage compared with WT (n = 15) (S12C Fig). Taken together, these results suggest that AtSCC4 is dispensable for male and female meiosis. Lehetséges, hogy a Arabidopsis SCC2-SCC4 complex is only required for loading cohesin during mitosis, while AtSCC4 does not play a role in meiosis.

(A) WT, AtDMC1::AtSCC4 RNAi -M T2-161 és AtDMC1::AtSCC4 RNAi -N T2-102 (M and N refer the fragments used for the construction of RNAi plasmids) plants. Bar = 3 cm. (B) Primary stems of WT, T2-161 és T2-102. Bar = 3 cm. (C) Siliques of WT, T2-161 és T2-102. Bar = 1 cm. (D) Stripped siliques of WT, T2-161 és T2-102. Yellow arrows indicate undeveloped embryos. Bar = 1 mm. (E) Plots of total seeds, live seeds and dead seeds in WT, T2-161 és T2-102 (* P < 0.05 or ** P < 0.01, the significance of reduced seed number in AtSCC4 RNAi transgenic plants versus WT, by two-tailed Student’s t test each dot represents the number of seeds in one silique). (F-H) Open flowers of WT, T2-161 és T2-102. Bar = 1 mm. (I-K) Alexander staining of WT, T2-161 és T2-102 anthers. Bar = 100 μm. (L-N) Zoom-in of WT, T2-161 és T2-102 pollens. (O) Plots of viable pollen in WT, T2-161 és T2-102 (** P < 0.01, the significance of reduced pollen number in AtSCC4 RNAi transgenic plants versus WT, by two-tailed Student’s t test each dot represents the number of pollen in one anther). (P-Q) Toluidine blue dye staining of WT, T2-161 és T2-102 tetrad-stage microspores. Bar = 100 μm. (S) Plots of normal and abnormal tetrad-stage microspores in WT, T2-161 és T2-102.

The AtSCC2 PHD domain binds to histones in vitro

Among SCC2 homologs, only those of plants contain a plant homeodomain (PHD) with a C4-H-C3 amino acid motif (S13A and S13B Fig). Phylogenetic analysis demonstrates that the SCC2 PHD domain is highly conserved in land plants, but absent in the green algae Chlamydomonas reinhardtii, Volvox carteri és Micromonas (S13B Fig), suggesting that the SCC2 PHD domain may have played an important role during the adaptation of plants to terrestrial environments.

Some PHD domains can bind to unmodified H3K4 or methylated H3K4 in animals and plants [51, 52]. To investigate the potential histone binding specificity of the AtSCC2 PHD domain, we aligned several plant SCC2 PHD sequences and compared them to PHD domains with known histone binding targets (S13C Fig). PHD domains that recognize methylated H3K4 possess three aromatic amino acids (Y-Y-W), but these are absent in the AtSCC2 PHD domain, suggesting that AtSCC2 may not bind methylated H3K4. Based on the alignments, the AtSCC2 PHD domain is more similar to the human BHC80 PHD domain which can bind unmodified H3K4 [53]. To test whether the AtSCC2-PHD has a similar binding affinity, we used an in vitro pull-down assay of two different length AtSCC2-PHD constructs (701–750 aa and 687–775 aa) and a known AtING2 PHD domain as positive control [52] with calf thymus histones. The result showed that the AtSCC2-PHD is able to bind to histones, similar to the AtING2-PHD positive control, but the longer AtSCC2-PHD has a stronger binding affinity than the shorter one (Fig 7A). The pull-down assay using H3 from calf thymus showed AtSCC2-PHD can bind to H3 (Fig 7B). We further tested AtSCC2-PHD with different length unmodified histone peptides. As expected, the HsBHC80-PHD positive control was able to bind to N terminal unmethylated H3 peptides. In contrast, AtSCC2-PHD was able to bind either H3 1–22, H2A 1–22 or H4 1–24 peptides, but not H2A variant H2A.Z (Fig 7C). Binding assays with modified histone H3, H4 and H2A tails showed that methylation does not affect the binding affinity, but acetylation inhibits binding (Fig 7D–7F). These results suggest that the AtSCC2 PHD domain may recognize intact histone octamers.

(A) Pull-down assay of GST, GST-AtING2PHD, GST-AtSCC2PHD (687–775 aa), GST-AtSCC2PHD (701–750 aa) with calf thymus histones. (B) Pull-down assay of GST, GST-HsBHC80PHD, GST-AtSCC2PHD (687–775 aa) with H3. (C) Pull-down assay of GST, GST-HsBHC80PHD, GST-AtSCC2PHD (687–775 aa) with different histone peptides in N terminal length. (D) Pull-down assay of GST, GST-HsBHC80PHD, GST-AtSCC2PHD (687–775 aa) with unmodified and modified H2A peptides. (E) Pull-down assay of GST, GST-HsBHC80PHD, GST-AtSCC2PHD (687–775 aa) with unmodified and modified H3 peptides. (F) Pull-down assay of GST, GST-HsBHC80PHD, GST-AtSCC2PHD (687–775 aa) with unmodified and modified H4 peptides.

The AtSCC2 PHD domain is required for meiosis but not mitosis in vivo

To test the function of the AtSCC2 PHD domain in vivo, we transformed Atscc2-5 +/- (Atscc2-5 -/- is a weak allele) and Atscc2-1 +/- (Atscc2-1 -/- is a null allele) mutant plants with constructs encoding full-length AtSCC2 and AtSCC2-PHDΔ (PHD domain deletion in 702–745 aa) expressed from the ubiquitous AtACT7 promoter (Fig 8). qRT-PCR confirmed that the AtACT7::AtSCC2 és AtACT7::AtSCC2PHDΔ transgenes are expressed in four representative lines, compared to WT and Atscc2-5 mutant controls (S14 Fig). Neither AtSCC2 nor AtSCC2-PHDΔ in Atscc2-5 mutant background (called Atscc2-5 AtACT7::AtSCC2 és Atscc2-5 AtACT7::AtSCC2PHDΔ) affect vegetative growth of the transgenic plants compared to WT or Atscc2-5 controls (Fig 8A). Azonban, AtACT7::AtSCC2 is able to rescue (Fig 8D, 8J, 8P and 8V1) the fertility and aberrant meiotic phenotypes of Atscc2-5 (Fig 8C, 8I, 8O and 8U1). Ellentétben, AtACT7::AtSCC2PHDΔ is not able to rescue the meiotic phenotypes (Fig 8E, 8K, 8Q and 8W1), suggesting that the PHD domain is required for the meiotic functions of AtSCC2.

(A) WT, Atscc2-5, Atscc2-5 AtACT7::AtSCC2, Atscc2-5 AtACT7::AtSCC2PHDΔ, Atscc2-1 AtACT7::AtSCC2 és Atscc2-1 AtACT7::AtSCC2PHDΔ növények. Bar = 3 cm. (B-G) Alexander staining of the corresponding anthers. Bar = 100 μm. (H-S) DAPI stained chromosome spreads and FISH with centromere probes at pachytene and diakinesis from the plants shown in panel A. Bar = 5 μm. (T1-Y2) Distribution of AtSYN1 signal at pachytene in meiocytes from the corresponding plants. Bar = 5 μm.

Mert a Atscc2-1 null allele is embryonic lethal, we examined whether the AtSCC2 PHD domain is also essential for mitosis, and found that Atscc2-1 AtACT7::AtSCC2 transgenic plants have normal vegetative growth, fertility and meiotic phenotypes (Fig 8A, 8F, 8L, 8R and 8X1), similar to WT. Ellentétben, Atscc2-1 AtACT7::AtSCC2PHDΔ transgenic plants also have normal vegetative growth, but have reduced fertility, increased pollen inviability, and aberrant meiotic phenotypes (Fig 8G, 8M, 8S and 8Y1), similar to Atscc2-5. These results provide in vivo evidence that the AtSCC2 PHD domain is required for meiosis and fertility, but not for vegetative development.

To further develop a mechanistic understanding of the AtSCC2-PHD domain in meiosis, we modeled the structure of full length AtSCC2 using the SWISS-MODEL web server (https://www.swissmodel.expasy.org) [54]. A kristályszerkezete Chaetomium thermophilum SCC2 (PDB code: 5T8V) was chosen as the template with the highest rank to build the predicted model. C. thermophilum és Arabidopsis SCC2 share 19.5% sequence identity. The results showed that AtSCC2 full length protein can fold into a hook-like structure (S15A Fig) that is thought to be important for cohesin loading function both in vitro és in vivo [26, 55, 56]. The structure also presents the PHD domain on the surface (S15A Fig), providing the possibility that it is available to bind to histones. We also modeled the uncorrected spliced transcript of Atscc2-5, which produces a protein with a severely attenuated hook-like structure which we speculate is incapable of mediating cohesin loading (S15B Fig).


DEVELOPMENT AFTER 1949

The development of biochemistry and molecular biology from 1949 to 2008 can be subdivided into two periods, each spanning about 30 years before and after China was opened up. Biochemical research from 1949 to 1988 was reviewed in Current Biochemical Research in China edited by C. L. Tsou and published by Akadémiai Kiadó in 1989 ( 4 ). After Nixon's visit in 1972, Jordan Tang at the Oklahoma Medical Research Foundation and Yuan-Chuan Lee at Johns Hopkins University were among the early American scientists visiting China. After coming back, they wrote an article, Biochemistry in the People's Republic of China kiadva A biokémiai tudományok trendjei February 1980 ( 5 ). This article reviewed some aspects of biochemical research and teaching in China before China's opening up.

Research Activities from 1949 to 1979, Before China's Opening Up

After 1949, the peaceful and stable environment favored the development of science and there was a surge of scientists returning from abroad. To promote the development of science, the Chinese Academy of Sciences was established in November 1949, right after the founding of New China in October 1949. In 1956, the Chinese Academy of Medical Sciences was also established. Many students were sent to the Soviet Union and obtained Candidate Degrees after their graduate studies. There was no education of graduate students in China after 1949 until Premier Zhou started “Marching toward Science” in 1956. In 1957, I was fortunate to pass the entrance examination and study protein chemistry in the Institute of Physiology and Biochemistry as a graduate student of Tian-Qin Cao (Tian-Chin Tsao). In the 50s and 60s of the last century, biochemical studies were mainly carried out in research institutes. In universities and medical colleges, most professors were busy with teaching and did not have enough time to do research. Zhi-Quan Liang and his colleagues at the Institute of Basic Medical Sciences, belonging to the Chinese Academy of Medical Sciences, were mainly concerned with protein research and later nucleic acids as well. In protein research, they developed plasma substitutes from bovine serum albumin. The Institute of Biochemistry directed by Ying-Lai Wang was mainly concerned with proteins, enzymes and nucleic acids. In enzymology, Chen-Lu Tsou (C.-L. Tsou) and Tsing-Ying Wang in collaboration with Ying-Lai Wang succeeded in the purification of membrane bound succinic dehydrogenase and found that its FAD prosthetic group was covalently linked to the enzyme protein ( 6 ). In 1962, Chen-Lu Tsou proposed a graphical method for the determination of the number and type of essential groups in protein molecules according to the relations between the fraction of activity remaining and the modification of a certain type of functional group ( 7 ). In comparison with Koshland's kinetic method, Tsou's method should have a much wider application. In muscle protein research, Tian-Chin Tsao et al. studied a series of tropomyosins and paramyosins from a variety of sources. In 1963, Tian-Chin Tsao, Tsu-Hsun Kung, et al. did pioneering electron microscopic studies on tropomyosin and paramyosin paracrystals ( 8 ). Tsao's group also studied plant viruses infecting tobacco, wheat and other crops in collaboration with many labs of plant pathology.


Basic Info.

Product Description

Customer Question & Answer

EDDHA-Fe Supplier

EDDHA-Fe is a brown powder.It is water soluble,which can be quickly absorbed.And is the most effective product to cure the plants of chlorosis of iron.

Type of Crops Alkalmazás
Fruit Trees(Apple,Pear,Peach,Lemons..) 7-13Kg/acre
Citrusfélék 10-15Kg/acre
Pistachio 10-15Kg/acre
Zöldségek 7-10Kg/acre
Szőlő 7-10Kg/acre
Omamentals,Flowers 7-13Kg/acre

3.2,Mix it with pesticides,which will enhance the function with each other.
3.3,Please spray it before 10am or after 4pm so that the plant will have the best absorption.
3.4,Please re-spray it if the rain comes in 2 hours.
3.5,Repeat treatments during the growing season according to agricultural and nutritional needs.

4.Package and Storage
4.1,10KG/BAG,20KG/BAG,200KG/BAG,250KG/BAG,500KG/BAG.
4.2,Please keep sealed and store in a dry place.

Kapcsolatba lépni
For more information,please contact us:
Att:Alisa Zhao
Phone/+86-18081956052


Hvp Hydrolyzed Vegetable Protein Hvp

Product Description
The raw materials are soybean or corn&comma which divided protein into 18 kinds of free amino acids and some small peptides&comma to use advanced hydrolyzed technology and filtering&comma decolor&comma remove heavy metals&comma spray-dried processed&period HVP is a taste and flavour enhancer&period

This HVP was unique created with low temperature&comma low acid and low pressure by Dr Xin Weiming who is back from USA&period To avoid the loss and broken of delicious flavor and smell&comma because of traditional processing with high temperature&comma strong acid which will destroy the delicious flavor&comma our processing kept plant protein the unique freshness and special flavor&comma pure and rich flavor&comma which is the best raw materials for flavorings&comma Widely apply on Food industry&period

Standard quality&colon
Alkalmazás
Widely apply on chicken bouillon&comma all kinds of soup&comma sauce flavoring&comma seasoning packets of instant noodles&comma meat products&comma bread&comma baked goods&comma household spices&comma frozen food also for amino acid nutritional supplementation&period Providing nutritional&comma increasing freshness&comma goodtasting&comma also reducing MSG&comma I&plusG dosage and save cost&period
Recommendation dosage
Chicken bouillon&colon 2-15&percnt
Flavoring&comma Seasoning packet&comma instant noodles seasoning packet&colon 1-10&percnt
All soup&comma soy sauce&colon 1-20&percnt
Meat products&comma bread&comma baked goods&comma household spices&comma frozen food&colon 0&period5-5&percnt

Csomag
Paper bag or barrel&comma easy moisture&comma Please keep sealed and store in a dry place
Shelf life&colon 18 months&period
Exclusive agents of countries or regions wanted now


SUMOylation of GMFB regulates the stability and function of GMFB in RPE cells under oxidative stress and inflammation

Glia maturation factor beta (GMFB) is a growth and differentiation factor that act as an intracellular regulator of signal transduction pathways. The SUMOylation is a post-translational modification (PTM) that plays a key role in protein subcellular localization, stability, transcription, and enzymatic activity. Recent studies have highlighted the importance of SUMOylation in the inflammation and progression of numerous diseases. But little is known about the relationship between GMFB and SUMOylation. Here we first report that GMFB can be mono-SUMOylated at multiple sites by the covalent addition of a single SUMO1 protein, and identified K20, K35, K58, and K97 as major SUMO acceptor sites. We also found that SUMOylation leading to increased stability and trans-localization of GMFB. Furthermore, RNA-seq data and Real-time quantitative polymerase chain reaction (rt-qPCR) also indicated that the SUMOylated GMFB upregulated multiple pathways, including the cytokine-cytokin receptor interaction, NOD-like receptor signaling pathway, TNF signaling pathway, RIG-I-like receptor signaling pathway, and NF-kappa B signaling pathway. Our studies intend to provide a novel direction for the study into the biofunction of GMFB, SUMOylated GMFB and the mechanism, clinical therapy, and prognosis of inflammation-related RPE disorders like age-related macular degeneration (AMD) and diabetic retinopathy (DR).


Nézd meg a videót: Márciusban virágzó növények - Család-Barát magazin - Borhy kertészet (Október 2022).